提高bFGF基因表达水平的策略及其表达产物的纯化工艺

来源 :中国肿瘤生物治疗杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nini126
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的: 通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离,以提高bFGF目的蛋白表达量。方法: 以Klenow和Mung Bean Nuclease通过增加2个及减少2个碱基调整SD序列和ATG之间距离,SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白表达量,以高压液相疏水层析、凝胶过滤及肝素亲和层析纯化目的蛋白、MTT法进行活性测定。结果: 获得了重组质粒pLX2,pLX3,诱导后与表达质粒pLX1(7.78%)相比,表达量分别为8.03%,9.9%,经纯化后获得的bFGF纯度达98%,ED50为2.29 ng/ml。结论: 调整SD序列和ATG之间距离可以增加目的基因的剂量,从而提高了目的基因在大肠杆菌中的表达水平。
其他文献
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
盐酸克伦特罗(clen-buterol)又名氨哮素、克喘素,化学名称为羟甲叔肾上腺素,是一种强效激动剂,可引起交感神经兴奋,在治疗剂量下,具有松弛气管平滑肌作用,临床上用于治疗哮
目的 观察重组人促红素注射液(RHEI)辅助亚低温治疗对缺氧缺血性脑病(HIE)患儿临床疗效及安全性的影响.方法 选择2015年1月至2017年12月在石家庄市第一医院接受治疗的HIE患儿
期刊
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
期刊