烟酰胺单核苷酸（nicotinamide mononucleotide, NMN）具备多种生物学功能，对心脑疾病、老年退行性疾病、神经退行性疾病、抗衰老等具有治疗作用。经NMN处理后的骨骼肌对衰老相关的转录变化有显著的预防作用，但NMN对骨骼肌增殖分化有何作用尚不明确。为深入了解NMN对细胞成肌分化的影响、丰富肌肉生长发育的机制，本研究以小鼠（Mus musculus）成肌细胞（mouse myoblasts） C2C12为模型，将不同浓度的NMN （0, 0.1, 1和2μg/mL）应用于2%马血清（horse serum, HS）诱导分化的C2C12。采用CCK-8 （Cell Counting Kit-8）法检测NMN处理后C2C12细胞的活力；通过2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐（2’,7’-dichlorodi-hydrofluorescein diacetate, DCFH-DA）和四氯四乙基苯并咪唑碳菁碘（5,5’,6,6’-tetrechloro-1,1’,3,3’-tetraethyl benzimidazol carbocyanine iodide, JC-1）两种荧光探针，分别对细胞进行染色，检测NMN对C2C12细胞线粒体膜电位和活性氧（reactive oxygen species, ROS）的影响；利用Western blot及免疫荧光技术检测肌细胞分化标记因子肌生成素（myogenin, MyoG）、肌分化因子1 （myogenic differentiation 1,MyoD1）表达和肌球蛋白重链（myosin heavy chain, MYH）的蛋白表达水平。结果显示，0、0.1、1和2μg/mL的NMN对C2C12细胞没有毒性作用，并且一定浓度的NMN在一定时间内可以促进细胞活力，提高线粒体膜电位，上调成肌分化相关蛋白MyoG、MyoD1和MYH的表达。上述研究结果表明，一定浓度的NMN在一定时间内可以促进C2C12细胞成肌分化。本研究丰富了NMN的生理作用，为后续NMN在畜牧产业的应用提供新的参考基础。