【摘 要】
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构建了含拟南芥Ca2+泵基因ECA1特异片段反向重复结构的RNA干扰(RNAi)载体,以根癌农杆菌介导转化拟南芥,用卡那霉素筛选和PCR检测,获得了11个T3代纯合体转基因株系;半定量RT-P
【机 构】
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北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心,北京,100097内蒙古农业大学生物工程学院,呼和浩特,010018;北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心,北京,100097;内蒙古农业大学生物工程学院
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构建了含拟南芥Ca2+泵基因ECA1特异片段反向重复结构的RNA干扰(RNAi)载体,以根癌农杆菌介导转化拟南芥,用卡那霉素筛选和PCR检测,获得了11个T3代纯合体转基因株系;半定量RT-PCR方法检测ECA1在转基因株系中转录的结果表明,其转录产物比野生型(WT)明显低,且转基因株系之间差异明显,表达水平有一个梯度关系;在1/2MS培养基上转基因株系与野生型的差异不明显,相对于野生型而言,在相对低Ca2+(0.2mmol·L-1)或相对高Mn2+(0.5mmol·L-1)的培养基上的转基因株系生长受到不同程度的抑制,ECA1转录量越低,生长受到的抑制越大.据此认为:ECA1对植物的生长发育和抵御逆境胁迫有作用.
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