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为确诊一例发病山羊是否感染伪狂犬病病毒，采集发病羊体的肺脏和脑组织进行伪狂犬病病毒gE 基因 PCR 检测，并将病料接种至 PK-15细胞分离病毒，以及进行小鼠感染试验和 gD 基因分析。结果表明，PCR 检测结果 PRV 阳性，病料接种 PK-15细胞24 h 后，细胞开始出现细胞病变；将病毒感染小鼠，36 h后小鼠出现局部奇痒、死亡；gD 基因序列分析发现，分离毒株与 GenBank 中的 PRV gD 基因序列同源性均在98％以上，氨基酸同源性在99％以上；在分离毒株 gD 基因的808 bp～837 bp 位置上存在缺失与变异、高变重复区。本研究成功分离获得一株羊源伪狂犬病毒，为云南省羊伪狂犬病防控和基础研究提供资料。