评价机械牵张诱导大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)黏附能力增强时内皮素-1(ET-1)与p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的关系。
方法将PMVECs以0.5×105个/ml的密度接种于培养板(2 ml/孔)，采用随机数字表法分为5组(n＝24)：正常对照组(C组)、机械牵张组(MS组)、机械牵张＋PI3K特异性抑制剂LY294002组(LY组)、机械牵张＋p38 MAPK特异性抑制剂SB203580组(SB组)、机械牵张＋ET受体A阻断剂BQ123组(BQ组)。机械牵张：拉伸幅度20%，频率0.3 Hz，波形为正弦波，时间4 h。LY组、SB组和BQ组在机械牵张后分别加入终浓度均为10 μmol/L的LY294002、SB203580和BQ123，孵育10 min；随后加入提取的PMNs(5×105/孔)作用30 min。采用ELISA法检测培养液ET-1和IL-6浓度。采用Western blot法测定磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)和磷酸化Akt(p-Akt)表达水平。采用免疫组化法确定PMNs黏附率。采用real-time PCR法测定P-选择素mRNA的表达水平。
结果与C组比较，其余4组培养液IL-6和ET-1浓度升高，p-p38 MAPK、p-Akt和P-选择素mRNA表达上调，PMNs黏附率升高(P<0.05)。与MS组比较，LY组、SB组和BQ组培养液IL-6浓度降低，p-Akt和P-选择素mRNA表达下调，PMNs黏附率降低，BQ组培养液ET-1浓度降低，SB组和BQ组p-p38 MAPK表达下调(P<0.05)。
结论ET-1介导大鼠PMVECs机械牵张后黏附能力增强的信号机制可能与激活p38 MAPK和PI3K/Akt信号通路有关。