胶束电动色谱柱上酶反应测定低分子量肝素的抗凝血活性

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发展了一种基于胶束电动色谱(MEKC)结合柱上酶微反应的方法,用于测定低分子量肝素(LMWHs)的抗凝血活性。肝素与抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)结合后,将ATⅢ抑制凝血因子10(FXa)活性提高了约1000倍。通过测定FXa水解生色肽底物CPS产生的对硝基苯胺(p-NP)就可以测定FXa的活性。因此,通过LMWHs抑制FXa产生的对硝基苯胺的量就可以测定抗凝血活性。该方法将毛细管柱端作为微量的酶微反应器,以呋喃妥英(nitrofurantoin,NF)作为内标,依次将LMWHs溶液、ATⅢ溶液、FXa和CPS溶液
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