猪白细胞介素18基因的克隆、表达及生物学活性检测

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：aaa6862876

【摘要】

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通过RT-PCR方法直接从猪脾脏淋巴细胞中扩增出猪白细胞介素18（pIL-18）成熟蛋白基因的cDNA，克隆到pGEM—T载体，构建重组质粒pGEM-T-IL18，转化E．coli JM109感受态细胞，取PCR和酶切鉴定

【作者】

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郑兰兰贾云飞崔保安陈红英魏战勇陈瑞亮

【机构】

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河南农业大学牧医工程学院,河南省动物性食品安全重点实验室

【出处】

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生物工程学报

【发表日期】

：

2008年2期

【关键词】

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猪白细胞介素18 成熟蛋白原核表达活性检测 porcine interleukin-18 mature protein gene prokaryotic

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通过RT-PCR方法直接从猪脾脏淋巴细胞中扩增出猪白细胞介素18（pIL-18）成熟蛋白基因的cDNA，克隆到pGEM—T载体，构建重组质粒pGEM-T-IL18，转化E．coli JM109感受态细胞，取PCR和酶切鉴定为阳性的重组质粒进行序列测定。测序结果表明，pIL-18成熟蛋白基因核苷酸长度为474bp，编码157个氨基酸。将其克隆到表达载体pGEX6P-1中，构建重组质粒pGEX-IL18，转化E．coli BL21感受态细胞，用IPTG诱导表达。重组菌菌体裂解物SDS-PAGE可检测到相对分子

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