【摘 要】
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目的通过克隆肠道病毒71型结构前体蛋白P1和非结构蛋白3CD ,构建共表达P1前体蛋白和非结构蛋白3CD的真核双基因表达载体.方法设计合成脑心肌炎病毒（EMCV ）IRES序列的特异性引物
【机 构】
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广东省深圳市疾病预防控制中心微生物检验科,广东省深圳市罗湖区疾病预防控制中心微生物检验科
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目的通过克隆肠道病毒71型结构前体蛋白P1和非结构蛋白3CD ,构建共表达P1前体蛋白和非结构蛋白3CD的真核双基因表达载体.方法设计合成脑心肌炎病毒（EMCV ）IRES序列的特异性引物,克隆至真核表达载体pcDNA3.0上,命名为pc‐IRES.从手足口病重症患者分离 EV71病毒株,经逆转录聚合酶链式反应（RT‐PCR）技术分别扩增出EV71病毒的 P1前体蛋白区与3CD区的片段,并将其定向克隆至真核表达载体 pc‐IRES载体中IRES序列的上游和下游,随后转化到大肠埃希菌DH5α中,最后经PCR
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