牛肠道病毒 RT -PCR 检测方法的建立及初步应用

来源 :山东农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yanyuhan66

【摘要】

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参照GenBank中登录的牛肠道病毒（ BEV ）全基因组序列，针对其3 D基因设计合成了1对特异性引物，提取病毒RNA，逆转录为cDNA，进行PCR扩增，经条件优化，建立了BEV的RT-PCR检测方法，并对该方

【作者】

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侯佩莉程洪兵刘晓王洪梅何洪彬

【机构】

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山东省农业科学院奶牛研究中心

【出处】

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山东农业科学

【发表日期】

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2014年2期

【关键词】

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牛肠道病毒 3D基因检测 RT-PCRBovine enterovirus3D geneRT-PCRDetection

【基金项目】

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现代农业(奶牛)产业技术体系科学家岗位基金(Cars-37),泰山学者海外特聘专家基金(tshw20100417),国家自然科学基金(31072160),济南留学人员创业计划(20120203),山东省农业重大应用技术创新课题

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参照GenBank中登录的牛肠道病毒（ BEV ）全基因组序列，针对其3 D基因设计合成了1对特异性引物，提取病毒RNA，逆转录为cDNA，进行PCR扩增，经条件优化，建立了BEV的RT-PCR检测方法，并对该方法的特异性、敏感性进行验证。结果显示，该方法从分离的牛肠道病毒中扩增出了732 bp的特异性目的片段；且对牛传染性鼻气管炎病毒（ IBRV）、牛病毒性腹泻病毒（ BVDV）、牛轮状病毒（ BRV）、牛冠状病毒（ BCoV）等相关病毒均无交叉反应；其检出敏感度达10-1 TCID50。应用该方法对山

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