【摘 要】
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利用RT-PCR方法从鸡堆型艾美耳球虫（E.acervulina）子孢子中成功克隆热休克蛋白90（Hsp90）基因,并构建其原核和真核表达质粒pET30a-Hsp90和pVAX-Hsp90.重组表达的89 kD可溶蛋白免疫
【机 构】
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东北农业大学动物医学学院,黑龙江职业学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31172295,31272569）,2013年黑龙江省普通高等学校动物普通疾病防治重点实验室开放课题
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利用RT-PCR方法从鸡堆型艾美耳球虫（E.acervulina）子孢子中成功克隆热休克蛋白90（Hsp90）基因,并构建其原核和真核表达质粒pET30a-Hsp90和pVAX-Hsp90.重组表达的89 kD可溶蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,间接ELISA和Western-Blot表明,其反应性和特异性良好.真核表达质粒pVAX-Hsp90体外瞬时转染间接免疫荧光检测可见成功表达.雏鸡真核表达质粒免疫后进行攻虫保护试验,结果表明,pVAX-Hsp90组较空载体组及PBS组增重极明显（P＜0.01）,且肠道
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