探讨腺病毒介导热休克蛋白70(HSP70)对缺氧性肺动脉高压(HPH)新生大鼠肺的保护作用。
方法选取7～10日龄健康、清洁级Wistar新生大鼠128只，按随机数字表法随机分为HPH组和对照组。HPH组根据转染液不同分为盐水组、空病毒组、HSP70组，转染后置于80 mL/L氮氧混合气体的低氧舱内建立HPH模型。造模3、7、10、14 d测定各组新生大鼠平均肺动脉压力(mPAP)。应用反转录PCR和Western blot检测各组新生大鼠肺组织中HSP70、缺氧诱导因子－1α(HIF－1α)、内皮素－1(ET－1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA及蛋白表达。
结果1.缺氧3、7、10、14 d盐水组mPAP水平(M，Q：12.00，2.50；15.00，2.00；18.00，1.75；20.00，2.25)与对照组(M，Q：9.50，4.75；10.50，1.00；13.00，1.00；15.50，3.25)比较显著增高，差异均有统计学意义(z＝－3.28、－3.40、－3.34、－3.06,均P<0.01)；空病毒组(M，Q：13.50，2.00；15.50，1.75；18.00，1.00；22.00，4.25)与对照组比较显著增高，差异均有统计学意义(z＝－2.83、－3.40、－3.42、－2.97，均P<0.01)；HSP70组缺氧3、7、10 d的mPAP水平(M，Q：8.50，4.00；10.50，1.00；13.00，1.00)与对照组比较差异均无统计学意义(z＝－0.43、－0.00、－3.06，均P>0.05)。2.HSP70组缺氧3、7、10 d各时间点间HIF－1α、ET－1、iNOS mRNA比较差异均有统计学意义(F＝6.321、9.669、6.333，均P<0.01)，HSP70蛋白比较差异均有统计学意义(F＝16.463、3.637、17.749，均P<0.01)。3.缺氧3、7、10 d盐水组HIF－1α mRNA显著高于对照组，差异均有统计学意义(q＝4.312、9.106、6.151，均P<0.01)；空病毒组显著高于对照组，差异均有统计学意义(q＝3.982、9.235、5.352，均P<0.01)；缺氧3、7 d HSP70组低于空病毒组，差异均有统计学意义(q＝6.083、11.031，均P<0.05)。缺氧3、7、10 d盐水组ET－1 mRNA显著高于对照组，差异均有统计学意义(q＝5.112、10.086、6.264，均P<0.01)；空病毒组显著高于对照组，差异均有统计学意义(q＝4.182、12.238、5.864，均P<0.01)；缺氧3、7、10 d HSP70组低于空病毒组，差异均有统计学意义(q＝6.912、10.235、7.021，均P<0.05)。缺氧3、7、10 d盐水组iNOS mRNA显著高于对照组，差异均有统计学意义(q＝4.998、8.056、5.369，均P<0.01)；空病毒组显著高于对照组，差异均有统计学意义(q＝4.778、10.138、5.154，均P<0.01)，缺氧3、7、10 d HSP70组低于空病毒组，差异均有统计学意义(q＝7.819、9.838、6.156，均P<0.05)。缺氧3、7、10 d盐水组HIF－1α蛋白显著高于对照组，差异均有统计学意义(q＝3.146、3.012、4.106，均P<0.05)；缺氧10 d空病毒组显著高于对照组，差异有统计学意义(q＝3.468，P<0.05)；缺氧3、7、10 d HSP70组显著低于空病毒组，差异均有统计学意义(q＝3.876、4.108、4.021，均P<0.05)。缺氧3、7、10 d HSP70组ET－1蛋白显著低于盐水组，差异均有统计学意义(q＝3.367、2.983、3.246，均P<0.05)；且显著低于空病毒组，差异均有统计学意义(q＝3.268、2.678、3.567，均P<0.05)。缺氧3、7、10 d盐水组iNOS蛋白显著高于对照组，差异均有统计学意义(q＝3.360、3.567、3.567，均P<0.05)，HSP70组低于空病毒组，差异均有统计学意义(q＝3.126、3.908、3.087，均P<0.05)。
结论腺病毒介导HSP70可以提高HPH新生大鼠肺组织HSP70表达，下调HIF－1α、ET－1、iNOS表达，降低肺动脉压力。