食管癌低表达cDNA片段C6-2A的克隆及表达分析

来源 :中华医学遗传学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ganmaogaishilangren
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目的 克隆人食管癌发生相关的基因。方法 用m R N A 差异显示技术分离、克隆食管癌组织中不表达或低表达的c D N A 片段,再通过 Northern blot 、dot blot 和 R T P C R 证实。结果 获得280bp 的c D N A 片段,命名为 C62 A。与 Gen Bank 基因数据库比较,未发现 C62 A 与任何已知基因有同源性。查询 E S T 数据库,发现 C62 A 与ne27b03 ,s1 N C I C G A P C03 人c D N A 克隆898541 及人卵巢肿瘤c D N A 克隆755196 等高度同源。 Northern blot 结果显示6/6 例食管癌组织表达丧失或低表达,dot blot 分析表明7/8例食管癌组织低表达, R T P C R 显示食管癌细胞系 E C109 、 E C8712 、 E C9706 和肺腺癌细胞系 G L C82 极弱表达,17/20 例食管癌组织表达丧失或低表达,胎儿食管、皮肤、大脑、胎盘较高表达,胎儿胃、肝较弱表达,胎儿心、小肠、肾不表达。结论 在食管癌细胞系和食管癌组织高频率的不表达或低表达提示, C62 A 很可能与食管癌的发生、发展有关。 Objective To clone gene related to human esophageal cancer. METHODS: mD N A differential display technique was used to isolate and clone c D N A fragments that were not expressed or were lowly expressed in esophageal cancer tissues. The results were confirmed by Northern blot, dot blot and RT-PCR. Results A 280 bp cD N A fragment was obtained and named C6-2A. Compared with the Gen Bank gene database, no homology was found between C6-2A and any known gene. By querying the E S T database, we found that C6-2 A and ne27b03, s1 N C I C G A P C03 human c D N A clone 898541 and human ovarian tumor c D N A clone 755196 were highly homologous. Northern blot results showed that 6/6 cases of esophageal cancer tissue expression loss or low expression, dot blot analysis showed that 7/8 cases of esophageal cancer tissue low expression, R T  P C R showed esophageal cancer cell lines E C109, E C8712, E C9706 And lung adenocarcinoma cell line G L C  82 was extremely weakly expressed, 17/20 cases of esophageal cancer tissue expression was lost or low expression, fetal esophageal, skin, brain, placenta higher expression, fetal stomach, liver weak expression, fetal heart The small intestine and kidney do not express. Conclusions The high frequency of esophageal cancer cell and esophageal cancer tissue expression or low expression suggests that C6  2 A is likely related to the occurrence and development of esophageal cancer.
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