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目的
观察泛素蛋白酶体系统(UPS)在氧化低密度脂蛋白(ox–LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤中的表达变化。
方法运用不同浓度及时间点的ox–LDL处理HUVECs,采用免疫印迹技术检测泛素抗体(Ub)及E1酶(泛素激活酶)、E2酶(泛素耦联酶)、E3酶(泛素连接酶)的表达。
结果ox–LDL可上调HUVECs的Ub、E1酶、E2酶、E3酶表达,并呈剂量依赖性(与对照组比较,灰度值分别为:0.46±0.08比0.25±0.09;0.63±0.09比0.45±0.09;0.49±0.07比0.35±0.06;0.67±0.05比0.45±0.05。以上结果均为ox–LDL 100 μg/ml,均P<0.05);ox–LDL(100 μg/ml)作用于HUVECs,上述蛋白的表达上调,并于12 h和24 h出现两个表达高峰。与对照组比较,12 h灰度值分别为:0.58±0.08比0.25±0.09; 0.72±0.08比0.45±0.08; 0.65±0.10比0.35±0.06; 0.65±0.05比0.43±0.05。24 h灰度值分别为:0.72±0.08比0.25±0.09; 0.79±0.08比0.45±0.08; 0.72±0.04比0.35±0.06; 0.65±0.05比0.43±0.05,均P<0.05。
结论ox–LDL诱导的HUVECs的损伤与泛素蛋白酶系统被激活有关。