RNA靶向的CRISPR/CasRx系统在小鼠精原细胞系GC1-spg中的应用

来源 :基础医学与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户：uuuuurzm

【摘要】

：

目的探究CRISPR/CasRx介导的RNA水平的基因敲降在小鼠精原细胞系GC1-spg的应用。方法利用同源重组的方法构建EF1a core promoter.CasRx.SV40.U6.DRs表达质粒(CasRx-gRNA)和EF

【作者】

：

李梦真柳俊邹定峰缪时英王琳芳宋伟李凯

【机构】

：

中国医学科学院基础医学研究所

【出处】

：

基础医学与临床

【发表日期】

：

2021年5期

【关键词】

：

CRISPR/CasRx RNA 敲降 GC1-spg

【基金项目】

：

国家自然科学基金(31970794,32000586)。

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目的探究CRISPR/CasRx介导的RNA水平的基因敲降在小鼠精原细胞系GC1-spg的应用。方法利用同源重组的方法构建EF1a core promoter.CasRx.SV40.U6.DRs表达质粒(CasRx-gRNA)和EF1a.EGFP、EF1a.mCherry、EF1a.tdToamto 3种荧光蛋白表达质粒。在人胚肾细胞系HEK-293T内瞬时转染3种荧光蛋白表达质粒和CasRx-gRNA表达质粒,通过荧光强度、Western blot检测外源基因(荧光蛋白、EGFP和mCherry)的敲降

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