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用高效液相色谱法测定某样品中的含量时，在波长小于254nm下，其流动相一般用磷酸铵、磷酸或磷酸缓冲液调节酸性。《蜂王浆》（GB9697-2002）中检测王浆酸时用高效液相色谱法一内标法，其流动相为甲醇：盐酸：水。本次试验是将该流动相由盐酸改为磷酸铵、磷酸或磷酸缓冲液调节酸性，将内标测定法改为外标测定法。经过多次筛选，并对筛选后的方法进行方法验证，结果表明：用O．09mol／L的磷酸溶液来调节流动相酸性、高效液相色谱法一外标法测定蜂王浆冻干粉中的蜂王酸，该方法能够满足《中国药典》中附录高效液相色谱法要求。