【摘 要】
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肉桂酸4-羟化酶(cinnamate-4-hydroxylase, c4h)是合成黄酮类化合物的关键酶之一。为了研究Dlc4h基因的结构及其在龙眼次级代谢产物合成中的功能,本研究采用实时荧光定量PCR(
【机 构】
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哈尔滨商业大学药物工程技术研究中心; 哈尔滨商业大学药学院; 哈尔滨商业大学图书馆;
【基金项目】
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黑龙江省普通本科高等学校青年创新人才培养计划(UNPYSCT-2017210);哈尔滨商业大学青年科研项目(17XN007);哈尔滨商业大学博士启动基金(14LG06;2016BS24);哈尔滨商业大学研究生创新项目(YJSCX2018-545HSD);黑龙江省自然基金(H2017001);哈尔滨市应用技术研究与开发项目(2016RQQXJ127)共同资助
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肉桂酸4-羟化酶(cinnamate-4-hydroxylase, c4h)是合成黄酮类化合物的关键酶之一。为了研究Dlc4h基因的结构及其在龙眼次级代谢产物合成中的功能,本研究采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析Dlc4h基因在龙眼根、茎、叶组织中的特异性表达,并对该基因进行了生物信息学分析。定量分析结果表明:Dlc4h基因在各组织中均有表达,表达量由高到低依次为根、茎、叶。生物信息学分析结果表明:该基因全长1 611 bp,编码536个氨基酸;蛋白质相对分子质量为61 389.45 Da,等电点(pI)为8.82;它是一种不含信号肽、有跨膜结构、定位于质膜的可溶性亲水蛋白;二级结构主要包括α-螺旋和无规则卷曲,并具有卷曲螺旋结构;采用SWISS-MODEL构建Dlc4h三级结构模型,运用Ramachandran评估表明该模型准确可靠;Dlc4h预测得到的配体结合位点分别为128Arg、145Val、146Phe、153Trp、157Arg、213Met、329Ile、332Ala、333Ala、336Thr、337Thr、340Ser、402His、467Pro、468Phe、473Arg、475Cys和476Pro。本研究的结果为进一步研究Dlc4h基因在龙眼黄酮类化合物生物合成途径中行使的功能提供依据。
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