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以N-异丙基丙烯酰胺（NIPAM）为温敏单体，引入线性聚甲基丙烯酸印．羟乙酯（PHEMA）或乙二胺胺化的聚甲基丙烯酸移羟乙酯（PAEMA），制备多孔半互穿水凝胶，并引入马来酰亚胺基团修饰，制备了两种新型水凝胶酶固定化载体I和II，凝胶的平均孔洞大小均约在10gm以上。以I和II为载体，马来酰亚胺与巯基的点击反应为基础，进行脂肪酶与糖化酶的固定化研究。结果表明，通过点击反应固定化得到的固定化脂肪酶最高活力回收率达6．03％，是相同条件下戊二醛固定化的5倍左右，且稳定性较高。