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以伪狂犬病毒Ea株BamHI5’片段为模板，PCR扩增出约0．6kbORF-1基因完整编码区序列，将该基因克隆到pBluescriptⅡSK^＋中，构建重组载体pSKORF1。进一步将该片段插入真核表达载体pEGFP-C1的增强型绿荧光蛋白EGFP下游，构建真核表达载体pEGFPORF1，脂质体法转染BHK-21细胞，G418加压筛选至正常细胞完全死亡。在倒置荧光显微镜下观察，可见pEGFPORF1转染的细胞在细胞膜和细胞浆中发出较强的荧光，证明ORF-1基因在BHK-21细胞中获得了表达。