论文部分内容阅读
质粒pMD-18T—ap65—3经XhoI和BamH l双酶切，1．0％凝胶电泳后纯化回收阴道毛滴虫黏附蛋白65—3基因，定向克隆至原核表达载体pET-32a（＋），构建原核表达质粒pET32a—ap65—3。重组质粒转化大肠埃希菌JM109感受态细胞中，筛选阳性克隆，进行PCR、酶切及测序鉴定正确后，将重组质粒pET32a—ap65—3转化于大肠埃希菌BL21中，异丙基-β-D硫代半乳糖苷（IPTG）诱导重组蛋白表达后利用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和免疫印迹（Western