【摘 要】
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以莴苣花叶病毒为研究对象,将带有LMV纳米酶标记的兔抗体Ig G与硝酸纤维素膜质控线上的兔抗体结合,并在二氨基联苯胺(Diaminobenzidine,DAB)的作用下进行显色,建立纳米酶免疫
【机 构】
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新疆农业大学农学院; 中国检验检疫科学研究院; 中国科学院生物物理研究所; 乌鲁木齐海关;
【基金项目】
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国家重点研发计划资助(2016YFF0203200);国家科技重大专项(2018ZX10101004002004)
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以莴苣花叶病毒为研究对象,将带有LMV纳米酶标记的兔抗体Ig G与硝酸纤维素膜质控线上的兔抗体结合,并在二氨基联苯胺(Diaminobenzidine,DAB)的作用下进行显色,建立纳米酶免疫层析试纸条方法 (Nanozyme Immunochromatographic Strip Assay,NISA)。用研制的NISA和酶联免疫吸附测定法(ELISA)对提纯LMV进行灵敏度比较实验,结果显示NISA和ELISA可分别检测低至102 ng/mL和103ng/mL的提纯LMV,前者比后者灵敏度高10倍,表明该试纸条具有较高的灵敏度,同时又具有比ELISA操作简单,价格低廉上的优势。用同属同寄主病毒作对照进行特异性实验,结果显示只有LMV为阳性,7种对照病毒均为阴性,表明建立的NISA具有良好的特异性。用研制的试纸条对待测样品进行检测,并用ELISA方法及基因测序方法对检测结果进行验证,数据显示三者结果一致。该试纸条的研制为LMV的检测提供了一种快速、高效的新技术。
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