【摘 要】
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目的：应用抑制性消减杂交（SSH）技术筛选乙型肝炎病毒（HBV）X蛋白羧基端缺失40个氨基酸（HBx3＇-40）反式激活基因,克隆其反式激活的相关靶基因.方法：以HBx3＇-40蛋白表达质粒pcDNA3（-）-HBx3＇-40
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目的：应用抑制性消减杂交（SSH）技术筛选乙型肝炎病毒（HBV）X蛋白羧基端缺失40个氨基酸（HBx3＇-40）反式激活基因,克隆其反式激活的相关靶基因.方法：以HBx3＇-40蛋白表达质粒pcDNA3（-）-HBx3＇-40 转染Huh-7细胞,以转染pcDNA3（-）-HBx为对照;制备转染后的细胞裂解液,提取总RNA并逆转录为cDNA,经RsaⅠ酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与pUCm-T载体连接,构建cDNA
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