大鼠ETFβ基因过表达对NADPH氧化酶基因表达的影响

来源 :中国中西医结合肾病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:charlehc1986
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目的 构建大鼠ETFβ的重组质粒并检测其在人胚胎肾293T细胞中的表达和对NADPH氧化酶的影响.方法 应用RT-PCR方法从大鼠肾脏组织总RNA中扩增出编码ETFβ的cDNA,克隆至pUM-T载体并测序,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,酶切鉴定后测序,测序正确后用磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK293T细胞,使用RT-PCR方法检测空载体组和重组质粒转染组的NADPH氧化酶各亚基mRNA水平的表达变化.结果 (1)测序结果证实PCR扩增得到编码ETFβ的cDNA序列正确;(2)磷酸钙
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