随着我国养猪业的发展和进步，对于疾病的鉴别诊断和大数据分析提出了更高的要求和目标。为建立一种同时检测7种猪（Sus scrofa）繁殖障碍性疫病的方法，促进高通量检测技术在动物病原检测中的发展和应用，本研究针对猪伪狂犬病毒（Pseudorabies virus, PRV）、猪日本乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV）、猪瘟病毒（Classical swine fever virus, CSFV）、猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2, PCV-2）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）、猪细小病毒（Porcine parvovirus, PPV）、非洲猪瘟病毒（African classical swine fever virus, ASFV） 7种猪繁殖障碍性疫病病原，设计特异性引物、探针，经反应条件优化、探针与微球偶联和杂交捕获反应，成功建立1种同时检测7种猪疫病的液相芯片检测方法，并将该方法进行临床应用。结果显示，微球与探针偶联效率较高，在液相环境中能实现对特异性目的基因捕获检测，该方法检测灵敏性较高，可同时检测到7种特异性病原的最低检测限度为103 copies/μL；该方法检测特异性好，与猪其他常见病原无交叉反应，重复性试验中组内和组间检测数据一致性较强。利用建立的方法对临床采集四川规模化猪场疑似发病的65份样品和ASFV阳性对照核酸进行检测和验证，共检出49份阳性样品，阳性率达75.38%（49/65），混合感染检出阳性率为23.08%（15/65），经单重PCR复检后结果一致，证实建立的液相芯片检测方法可应用于临床检测。本研究为猪病多种病原快速鉴别诊断提供有力的技术储备，同时为高通量检测技术的进一步发展提供参考。