H5N1型禽流感病毒核蛋白C端缺失削弱核蛋白间的相互作用

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wuyoucao654321

【摘要】

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目的：克隆H5N1型禽流感病毒的核蛋白（NP）基因，将其定向插入双分子荧光载体，在细胞水平验证NP-NP的相互作用，进而确定NP-NP相互作用的关键区域。方法：根据双分子荧光互补（BiFC）实验的载

【作者】

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李斌周晓巍张莹莹孙玉梅

【机构】

：

大连工业大学,军事医学科学院生物工程研究所

【出处】

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生物技术通讯

【发表日期】

：

2009年1期

【关键词】

：

禽流感病毒核蛋白双分子荧光互补 avian influenza virus nucleoprotein bimolecular fluorescence

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目的：克隆H5N1型禽流感病毒的核蛋白（NP）基因，将其定向插入双分子荧光载体，在细胞水平验证NP-NP的相互作用，进而确定NP-NP相互作用的关键区域。方法：根据双分子荧光互补（BiFC）实验的载体和NP基因序列设计引物，将NP的结构基因定向克隆到荧光载体上，得到重组荧光载体pBiFC-YC155-NP、pBiFC-YN155-NP、pBiFC-YC173-NP和pB-iFC-YN173-NP，瞬时转染293FT细胞，研究NP-NP相互作用；进一步对NP的C端进行缺失突变，然后定向克隆到pBiFC-YN

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