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用 MS 培养基,从甘蔗嫩叶或幼穗诱导愈伤组织,将愈伤组织放置 MS 液体培养基中悬浮培养,每3—5d 继代一次。MS 培养基附加2,4—D3mg/L,水解乳蛋白500mg/L,盐酸硫胺素1mg/L 以及椰子水5%。经4至5个月培养的悬浮培养物所分离的原生质体具有很强繁殖能力。原生质体植板于 K8P 琼脂糖培养基,持续细胞分裂和生长。原生质体衍生的无性系移到 MS 琼脂培养基,形成愈伤组织。9个糖蔗品种的原生质体形成这种愈伤组织,其中一个品种的愈伤组织在不含任何植物生长调节剂的 MS 培养基中分化出根来。