青霉素经β-内酰胺酶分解得到的产物青霉噻唑酸具有还原性,与亚铜试剂发生络合反应生成紫红色络合物,在一定范围内络合物的颜色深浅与β-内酰胺酶的量呈线性关系。将醋酸纤维素膜（CA）作为显色层放在亚铜试剂（2.5%2,2’-联喹啉乙醇溶液与0.2 mol/LCuSO₄溶液均匀混合）中浸泡10 min,进行显色反应,45℃下真空干燥30 min,制得β-内酰胺酶半定量快速检测试纸;配制β-内酰胺酶标准品溶液0²50 U/m L（0,6,12,25,50,100,150,200,250 U/m L）,在显色层进行显色反应后,利用分光测色仪测定不同梯度下的颜色,得到L*值,a*值和b*值,并应用色彩模块软件进行模拟,按照β-内酰胺酶标准液的浓度梯度进行排列、粘贴,制成β-内酰胺酶标准比色卡。通过试验得出β-内酰胺酶在牛奶样品中最低检出限为6 U/m L,相对误差范围7.51%¹5.38%。β-内酰胺酶半定量快速检测试纸具有快速、操作简单、经济实用、易于普及和现场测定的优点。