探讨维生素B6联用20AA复方氨基酸治疗创伤性凝血病有关机制。
方法114只雄性SD大鼠，按随机数字表法进行分组。创伤性凝血病大鼠模型建立实验使用60只大鼠，假手术组(10只)，模型组(50只)，其中模型组分别于造模后4 h，6 h，12 h，24 h和48 h时间点采集标本，每个时间点10只；新疗法疗效实验使用24只大鼠，分为假手术组，9%等渗盐水对照组，维生素B6与20AA复方氨基酸联合治疗组，共3组，每组8只；新疗法作用机制实验使用30只大鼠，正常组3只、假手术组3只、新疗法组与对照组各12只，其中新疗法组与对照组分别在伤后4 h，6 h，12 h及24 h四个时间点采集标本，每个时间点3只。通过造成大鼠重型颅脑损伤、双股骨骨折、开腹及腹主动脉放血20%，制成大鼠多发伤模型，进行干预后，按各时间点采集标本进行相应检测。创伤性凝血病大鼠模型建立实验采用血栓弹力图检测凝血功能变化，新疗法疗效实验分别采用血栓弹力图与凝血4项检测检测凝血功能变化，新疗法作用机制实验采用实时定量PCR检测凝血因子基因表达变化。
结果(1)创伤性凝血病大鼠模型建立实验：R值(反应时间)48h达到高峰，24 h，48 h与正常组比较具有统计学差异(P<0. 05)，K值(血块生成时间)和Angle值(血块生成率)各组变化不大，与正常组相比较无统计学意义；MA(最大宽度值) 4 h开始延长，48 h达到高峰，24 h，48 h与正常组比较具有显著统计学差异(P<0. 01)。(2)新疗法疗效实验：新疗法组与对照组比较，血栓弹力图R值为(2.24±0.68) min，显著低于对照组的(3.21±0.30) min(P<0.05)；新疗法组血栓弹力图Angle值为(81.98±1.78)°，显著高于对照组的(79.54±2.13)°(P<0.05)。传统凝血试验结果：凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)新疗法治疗组均比对照组低，而纤维蛋白原(FIB)新疗法治疗组高于对照组，但其差异不显著。(3)新疗法作用机制实验：与正常组相比，除FⅪ与FⅩⅢA亚基外，新疗法组和对照组的肝脏凝血因子基因表达明显上调，但随着造模时间延长，其表达水平逐渐下降；新疗法组与对照组相比，肝脏凝血因子基因表达水平更高，其差异具有统计学意义(P<0.05)。
结论建立与临床基本相符的大鼠创伤性凝血病模型，利用该模型验证了维生素B6联用20AA复方氨基酸疗法对创伤性凝血病大鼠凝血功能的改善作用，并发现该新疗法能够通过提高肝脏凝血因子基因mRNA表达水平，从而改善动物模型的凝血功能。