【摘 要】
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用RT-PCR的方法克隆李痘病毒的外壳蛋白(CP)基因,然后将其连接到原核表达载体p ET29(a)上,得到p ET29a-PPV重组载体,然后将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经过IPTG诱导PPV CP基因在
【机 构】
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中山出入境检验检疫局检验检疫技术中心,南沙出入境检验检疫局检验检疫技术中心,中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所
【基金项目】
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广东出入境检验检疫局科技项目;编号:2014GDK44
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用RT-PCR的方法克隆李痘病毒的外壳蛋白(CP)基因,然后将其连接到原核表达载体p ET29(a)上,得到p ET29a-PPV重组载体,然后将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经过IPTG诱导PPV CP基因在大肠杆菌中得到了高效表达。回收表达蛋白后免疫家兔,获得PPV特异性抗血清,经过酶联免疫吸附法测定其效价达到3.2×10^4,然后采用该抗血清制备出专门检测李痘病毒的胶体金免疫试纸条,测试结果表明,该试纸条不仅特异性强、稳定性好,灵敏度也高,可以检测到1μg/m L粗提病毒和稀释10
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