3T3-L1前脂肪细胞诱导分化方法的建立

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小鼠3T3-L1前脂肪细胞是目前研究脂肪相关疾病和脂肪沉积最常用细胞模型之一。本研究拟建立小鼠3T3-L1前脂肪细胞培养及诱导分化为成熟脂肪细胞的方法。采用油红O染色法对诱导分化成熟的脂肪细胞染色,镜下观察到在诱导分化后的7、8、9、d均有明显的脂质沉积,脂滴被油红O着染成鲜亮的橘红色,脂滴大小和数量均表现出逐渐增加的趋势。采用Real-time qPCR检测在3T3-L1前脂肪细胞的分化和脂质积累过程起重要调控作用的ADIPOQ和C/EBPα两个因子的相对表达量。结果表明:在小鼠3T3-L1前脂肪细胞的分化成熟阶段,随分化时间的延长ADIPOQ和C/EBPα在3T3-L1前脂肪细胞的脂质高度累积阶段分别呈现出逐渐降低和增加的趋势。通过形态学和分子生物学手段检测结果表明,本实验方法成功地将小鼠3T3-L1前脂肪细胞诱导为成熟的脂肪细胞。
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