【摘 要】
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目的观察微小RNA-21(miRNA-21)反义寡核苷酸对食管癌EC9706细胞的生长抑制作用。方法反义寡核苷酸转染食管癌EC9706细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测细胞miRNA-21水平,流式细胞仪检测细胞凋亡,FQ-PCR检测程序性细胞死亡因子4(PDCD4) mRNA表达水平,免疫荧光检测PDCD4蛋白表达。结果反义寡核苷酸抑制细胞活
【机 构】
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450052郑州大学护理学院,郑州大学第一附属医院胸外科
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目的观察微小RNA-21(miRNA-21)反义寡核苷酸对食管癌EC9706细胞的生长抑制作用。
方法反义寡核苷酸转染食管癌EC9706细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测细胞miRNA-21水平,流式细胞仪检测细胞凋亡,FQ-PCR检测程序性细胞死亡因子4(PDCD4) mRNA表达水平,免疫荧光检测PDCD4蛋白表达。
结果反义寡核苷酸抑制细胞活性的最佳浓度为0.5μmol/L,转染反义寡核苷酸后细胞内miRNA-21的表达水平明显下调为无义组的0.045±0.021,细胞凋亡明显增加为12.95%,生存率显著降低为(48.21±9.56)%,差异有统计学意义(P< 0.05)。反义寡核苷酸组中PDCD4 mRNA相对表达增高为0.452±0.002,且蛋白质表达水平增高,差异有统计学意义(P< 0.05)。
结论miRNA-2l反义寡核苷酸可通过上调PDCD4有效抑制食管癌EC9706细胞增殖并促进凋亡。
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