PRRSVSD-1株ORF7基因的克隆、测序及原核表达载体的构建

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参照PRRSVATCCVR2332株基因序列设计1对引物P1、P2,经RT-PCR扩增出PRRSV SD-1株0RF7基因,经与PMD18-T Vector连接后筛选出阳性克隆株测序。把PRRSV SD-1株ORF7cDNA亚克隆到PQE上构建PQE-N原核重组表达栽体。结果表明,PRRSVSD-1株0RF7核甘酸序列与PRRSV ATCC VR2332株0RF7核甘酸序列完全一致,与欧洲株LV符合率为589,5。成功构建原核表达栽体PQE—N,为N蛋白的研究和制备诊断性抗原奠定了基础。
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