【摘 要】
：
为研究内溶素SAL-2和人溶菌酶hLYZ的联合抑菌作用,本研究通过PCR方法分别从携带SAL-2和hLYZ基因的质粒中扩增目的片段,连接至腺病毒穿梭载体的多克隆位点上,构建重组穿梭载体
论文部分内容阅读
为研究内溶素SAL-2和人溶菌酶hLYZ的联合抑菌作用,本研究通过PCR方法分别从携带SAL-2和hLYZ基因的质粒中扩增目的片段,连接至腺病毒穿梭载体的多克隆位点上,构建重组穿梭载体pShuttle-SAL和pShuttle-LYZ.成功构建的重组穿梭质粒与Ad-easy骨架质粒在BJ5183中发生同源重组,重组得到的阳性重组腺病毒载体在脂质体介导下转染HEK293细胞,包装产生重组腺病毒Ad-SAL、Ad-LYZ、Ad-SAL-LYZ和对照重组腺病毒Ad-GFP,通过RT-PCR和Western blot方法检测mRNA和蛋白表达后,将构建的重组腺病毒进行扩增纯化并测定病毒滴度.结果表明,成功构建的重组腺病毒感染细胞后,SAL-2和hLYZ基因的mRNA均有表达,Western blot分别检测到28.6 ku和14.7 ku目的蛋白条带.扩增纯化后经TCIDw方法检测病毒滴度分别为108.7 TCiD50/mL、108, 50 TCID50/mL、108.63 TCID50/mL和107.60 TCID50/mL.表明成功构建包装的重组腺病毒对HEK293细胞具有较强的感染能力,可稳定介导SAL-2基因和hLYZ基因在HEK293细胞中的表达.
其他文献
为研究Spm对LFS诱导罗汉果不定根形成的影响,以罗汉果单芽茎切段为材料,MS为基本培养基,添加LFS0.2mg/L后,再分别添加Spm 0.0(ck),1.0,1.5,2.0,2.5,3.0mg/L,培养25d。结果表
本文以泉州市区内环路坪山路高架桥工程为例,介绍城市高架桥现浇箱梁的支架设计与施工.
建立了GPS/INS(Global Positioning System/Inertial Navigation System)紧组合模式下的线性/非线性模型,针对SRUKF(Square Root Unscented Kalman Filter)不能与该模型达到
为了加快玉米育种进程,利用100对SSR核心引物分析了44份玉米自交系的遗传多样性,并划分其杂种优势群.结果表明:有56对引物在44份玉米自交系间共检测出569个等位基因变异,每对
航空业是国民经济的基础性、先导性产业,对促进地区经济发展、加快产业结构转型、扩大对外开放、促进社会进步、保障和改善民生、维护民族团结与边疆稳定、巩固国防安全等发
介绍了杂交糯高粱品种川糯粱1号亲本的特征特性,综述了川糯粱1号杂交制种过程中制种田选择、播种、田间管理、花期调节与观测、去杂去劣、辅助授粉、病虫害防治、适时收获等
根据航空机载机电系统及附件的特点,在对国外“三化”工作研究分析的基础上,总结了50年来研制、生产机载机电系统及附件的经验,在更多类型产品中全面、深入地开展“三化”工
利用AMMI对8个贵州糯高粱品种(系)在6个试点的区试产量数据进行分析,旨在研究基因型×环境互作效应对糯高梁产量性状稳定性的影响.试验结果表明:8个糯高梁品种(系)平均产量顺
研究牛至精油对红罗非鱼品质和货架期的影响.以空白添加组为对照,分别在对照组饲料中添加250、500、1 000、2 000 mg/kg牛至精油,经过20周养殖实验,红罗非鱼在4℃条件下冷藏0
根据Gen Bank上公布的异尖科线虫线粒体COI序列设计特异性引物,对线虫样品进行PCR特异性扩增,扩增的目的片段大小为178 bp。结果显示,该PCR检测体系的特异性强,在其他非异尖