产肠毒素性大肠杆菌K99菌毛蛋白抗原基因的克隆与表达

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hzbhwh

【摘要】

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应用PCR从产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)中扩增出不含信号肽序列的K99菌毛蛋白基因片段,克隆测序后,将该片段连接到E.coli表达载体pET28a(+)中,转化E.coli表达菌株BL21(DE3),筛选

【作者】

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黄亚红梁婉琪潘爱虎王阿凤黄诚赵主江陈建秀周智爱张大兵

【机构】

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南京大学生命科学院生物科学与技术系,江苏南京,210093上海市农业科学院生物技术中心,上海市遗传育种重点实验室,上海,201106;上海市农业科学院生物技术中心,上海市遗传育种重点实验室,上海,20

【出处】

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中国兽医学报

【发表日期】

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2004年期

【关键词】

：

产肠毒素性大肠杆菌 K99 基因克隆 K99菌毛蛋白抗血清

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应用PCR从产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)中扩增出不含信号肽序列的K99菌毛蛋白基因片段,克隆测序后,将该片段连接到E.coli表达载体pET28a(+)中,转化E.coli表达菌株BL21(DE3),筛选得到可诱导表达K99抗原的工程菌株.经IPTG诱导,分离纯化K99重组蛋白,以其免疫新西兰大白兔,获得重组蛋白的兔抗血清;免疫印迹分析表明,此重组蛋白制备的抗血清能与标准的K99强毒株发生明显的抗原抗体反应.

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