分离、鉴定人血清中的Exosome，探讨将Exosomal miRNA作为疾病分子标志物的可能性。
方法回顾性研究。选择2013年1月西京医院门诊体检的健康男性血清10名，并收集2013年1月至2014年12月确诊的前列腺癌患者、良性前列腺增生患者和健康对照者血清各20例。采用ExoQuick从血清中分离Exosome，分别用透射电镜、NanoSight纳米颗粒分析仪和Western Blot对其进行形态学和分子表型鉴定，使用Agilent 2100生物分析仪进行Exosomal RNA质量分析。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miRNAs，并采用非参数分析法对血清不同组分中的miRNA表达量进行比较。
结果采用ExoQuick可以从人血清中分离到Exosome，其直径主要集中在40～100 nm，最大分布峰值为58 nm，Western Blot检测可见热休克蛋白HSP70和四跨膜蛋白CD63表达；Agilent 2100生物分析仪结果显示，该Exosome中的RNA组分主要为约25 nt的小RNA；qRT-PCR检测证实4种常见miRNA在人血清Exosome中均有表达，且Exosome中miRNA的表达量高于全血清样本(miR-21，U＝16，P＝0.007 2；miR-16，U＝3，P<0.000 1；miR-20a，U＝2，P<0.000 1；let-7a，U＝13，P＝0.003 2)和去除Exosome的血清上清(miR-21，U＝15，P＝0.006 5；miR-16，U＝2，P<0.000 1；miR-20a，U＝1，P<0.000 1；let-7a，U＝10，P＝0.002 8)；对前列腺癌(PCa)、良性前列腺增生(BPH)和正常对照人群各20名检测血清中循环miR-141和Exosomal miR-141水平，结果显示3组样本中Exosomal miR-141的表达水平均显著高于血清中的游离miR-141(对照组：U＝66，P＝0.000 3；BPH组：U＝83，P＝0.001 6；PCa组：U＝54，P<0.000 1)；并且PCa组的Exosomal miR-141表达水平显著高于BPH组和正常对照人群(分别为3.85倍，U＝74，P＝0.000 7和4.06倍，U＝70，P＝0.000 5)。
结论人血清中可以有效分离得到Exosome。与全血清样本相比，分离Exosome可以显著提高循环miRNA类的疾病标志物的检出。(中华检验医学杂志，2015, 38：557-561)