【摘 要】
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目的:建立和优化用于检测大田软海绵酸(OA)的固定化蛋白质磷酸酶2A (PP2A)抑制率法。方法以分离提取的PP2A为材料,根据OA抑制PP2A酶活性的原理,建立用于检测OA的固定化PP2A酶
【机 构】
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浙江海洋学院食品与医药学院,舟山 316022 浙江省水产品加工技术研究联合重点实验室,舟山 316022;浙江海洋学院食品与医药学院,舟山,316022;
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目的:建立和优化用于检测大田软海绵酸(OA)的固定化蛋白质磷酸酶2A (PP2A)抑制率法。方法以分离提取的PP2A为材料,根据OA抑制PP2A酶活性的原理,建立用于检测OA的固定化PP2A酶抑制率法,并对最佳酶用量和反应体系参数等进行优化。结果最佳固定化 PP2A 酶蛋白量2μg、固定化配比为琼脂糖与PP2A酶蛋白量为1:1、pH值为8.4;采取4参数Logistic曲线法进行标准曲线拟合,曲线R2值达0.994,检测限为3.45μg/L,实际样品测定时具有良好的准确性和重复性。结论建立的固定化PP2A酶抑制率法有望作为低成本、操作简单的OA快速筛检方法推广应用。
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