PRMT2基因的miRNA载体构建及其活性鉴定

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目的构建蛋白质精氨酸甲基转移酶2(PRMT2)基因的miRNA真核表达载体,鉴定其转染乳腺癌MCF7细胞株后的生物活性。方法根据PRM他基因序列设计合成4对pre.miRNA片段,定向克隆到pcDNA6.2.GW/EmGFP.miR真核表达载体上,采用菌落的PCR和测序分析鉴定插入序列的完整性;并将重组载体转染至McF7细胞株中,采用Westernblot方法鉴定重组载体转染MCF7细胞后对PRMT2蛋白表达的干扰效果以确定其生物活性。结果构建的重组体插入片段的碱基序列完全正确,并且重组体瞬时定转染MCF
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