探讨丹酚酸B联合诱导多能干细胞来源的神经干细胞(iPSCs-NSCs)对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能的修复作用，以及对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制剂金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)表达的影响，并观察蛋白激酶B(Akt)信号传导通路在该过程中的作用。
方法将诱导多能干细胞(iPSCs)诱导分化为神经干细胞(NSCs)，并行巢蛋白(nestin)免疫荧光染色。(1)其后进一步诱导分化为神经元，并分为4组：常规培养基组、丹酚酸B组(加入丹酚酸B 50 μmol/L)、丹酚酸B+GM6001组(加入丹酚酸B 50 μmol/L、GM6001 25 μmol/L)、丹酚酸B+LY294002组(加入丹酚酸B 50 μmol/L、LY294002 25 μmol/L)。分化后细胞进行微管相关蛋白2(MAP2)免疫荧光染色和实时定量PCR检测，并采用Western blotting检测常规培养基组、丹酚酸B组、丹酚酸B+LY294002组MMP-2、pAkt和Akt表达。(2)48只大脑中动脉闭塞模型大鼠按随机数字表法分为3组：PBS空白组、iPSCs-NSCs组、丹酚酸B+iPSCs-NSCs组，分别于纹状体处局部注射PBS、iPSCs-NSCs及丹酚酸B。造模7、14 d后应用Longa评分和SMA评分对各组大鼠神经功能进行评估；7 d后采用免疫荧光染色检测nestin表达，14 d后采用免疫荧光染色检测MAP2、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达；采用Western blotting检测各组MMP-2、TIMP-2表达。
结果(1)与常规培养基组、丹酚酸B+GM6001组、丹酚酸B+LY294002组比较，丹酚酸B组神经元计数、MAP2 mRNA相对表达量明显增高，差异均有统计学意义(P<0.05)。与常规培养基组、丹酚酸B+LY294002组比较，丹酚酸B组MMP-2、pAkt/Akt表达明显增高，差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)造模7、14 d后，与PBS空白组、iPSCs-NSCs组比较，丹酚酸B+iPSCs-NSCs组Longa评分、SMA评分明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05)；14 d后，与iPSCs-NSCs组比较，丹酚酸B+iPSCs-NSCs组MAP2表达明显增高，差异有统计学意义(P<0.05)；7、14 d后，与PBS空白组比较，iPSCs-NSCs组、丹酚酸B+iPSCs-NSCs组MMP-2表达明显增高，TIMP-2表达明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论丹酚酸B可促进iPSCs-NSCs向神经元分化。移植iPSCs-NSCs可促进脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能恢复。丹酚酸B联合iPSCs-NSCs可通过Akt信号传导通路调节MMP-2/TIMP-2系统促进iPSCs-NSCs向神经元分化，从而进一步促进神经功能恢复。