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用合成生物学和代谢工程技术,筛选并克隆丁醇合成途径中酶活性较高的 atoB ,hbd , crt,ter,adhE 2等5个关键酶基因,先通过重组 PCR 构建 pUC18-atoB-hbd-crt-ter 质粒,再将串联基因 atoB-hbd-crt-ter 和基因 adhE 2克隆至质粒 pET-21b 中,构建含丁醇合成途径的表达载体 pET-21b-atoB-hbd-crt-ter-adhE 2,将其转入大肠杆菌 E .coli BL21(DE3)中制备工程菌株.对样品进行 IPTG 诱导表达检测与色谱分析的结果表明,已合成出关键酶蛋白并产生一定量的丁醇.