目的 探讨信号传导及转录激活因子3 (signal transducers and activators of transcription,STAT-3)调控微RNA-21影响人舌鳞状细胞癌侵袭能力的效果和机制.方法 实验共分3大组:空白对照组、二甲基亚砜组(DMSO组)、小分子抑制剂组(WP1066组).采用STAT-3小分子抑制剂WP1066下调STAT-3表达;甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定Tscca和Tca8113P160舌癌细胞WP1066的半数抑制浓度(inhibitory concentration,IC5o);蛋白质印迹法检测WP1066处理后舌癌细胞STAT-3及pSTAT-3表达;实时定量PCR法检测微RNA-21表达水平;用Matrigel基质生长实验和Transwell体外侵袭实验检测肿瘤细胞生长形成球形克隆、侵袭能力;蛋白质印迹法检测肿瘤细胞侵袭相关蛋白表达.荧光素酶报告基因实验验证STAT-3与微RNA-21调控关系.结果 MTT法结果:Tscca、Tca8113P160细胞WP1066的IC50分别为3.1和3.5 μmol/L;WP1066组STAT-3及pSTAT-3表达水平低于空白对照组;WP1066组微RNA-21表达水平低于空白对照组.WP1066组细胞生长形成球形克隆能力减弱,直径减小(Tscca:F=15.751,P=0.004;Tca8113P160:F=12.964,P=0.007);通过Transwell小室聚碳酸酯膜的细胞数少于空白对照组(Tscca:F=1688.926,P=0.000;Tca8113 P160:F=327.528,P=0.000);基质金属蛋白酶2/9蛋白表达水平下调;金属蛋白酶抑制剂蛋白表达水平上调.荧光素酶报告基因实验证明微RNA-21是STAT-3的调控靶点.结论 抑制舌癌细胞中STAT-3活性可以下调微RNA-21表达并降低舌癌细胞的侵袭能力;为进一步探究STAT-3参与调控舌癌细胞侵袭转移能力的分子机制提供实验依据。
信号传导及转录激活因子调控微RNA-21影响人舌鳞状细胞癌细胞侵袭能力的体外研究
【摘 要】
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目的 探讨信号传导及转录激活因子3 (signal transducers and activators of transcription,STAT-3)调控微RNA-21影响人舌鳞状细胞癌侵袭能力的效果和机制.方法 实验共分3大组:空白对照组、二甲基亚砜组(DMSO组)、小分子抑制剂组(WP1066组).采用STAT-3小分子抑制剂WP1066下调STAT-3表达;甲基噻唑基四唑(methyl
【机 构】
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300060天津医科大学附属肿瘤医院颌面耳鼻喉肿瘤科·天津市肿瘤防治重点实验室,300060天津医科大学附属肿瘤医院颌面耳鼻喉肿瘤科·天津市肿瘤防治重点实验室,300060天津医科大学附属肿瘤医院颌面
【出 处】
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中华口腔医学杂志
【发表日期】
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2013年48期
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