布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白BPE043的功能和致病机制研究

来源 :中国人兽共患病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:idea0315
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目的 研究布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白BPE043在布鲁氏菌感染和胞内生存过程中的作用.方法 以羊种布鲁氏菌104株为起始菌株,通过同源重组的方法构建布鲁氏菌BPE043基因缺失株.将布鲁氏菌野生株104和突变株104△BPE043在相同的起始浓度下培养,观察它们生长变化的趋势;用野生株和突变株分别感染小鼠,构建小鼠体内感染模型,测定小鼠脾重并计算脾脏细菌载量;利用免疫共沉淀技术筛选BPE043蛋白的宿主互作蛋白.结果 成功构建了布鲁氏菌BPE043基因缺失株.与野生株相比,突变株104△BPE043在体外培养的生长趋势和野生株基本相同;小鼠感染实验显示,在感染1周后,两组小鼠脾均肿大,但突变株104△BPE043感染组小鼠脾重低于野生株104感染组小鼠脾重;在感染后两周,两组小鼠脾肿大现象开始减轻.在细菌载量方面,在感染1周后,突变株104△BPE043感染小鼠的脾脏细菌载量低于野生株104感染小鼠;在感染后2周,突变株感染组的脾细菌载量下降趋势更明显.免疫共沉淀实验显示BPE043蛋白与鼠源小分子GTP结合蛋白Rab4和Rab11存在相互作用.结论 布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白BPE043是布鲁氏菌重要的毒力因子.本研究为进一步探索BPE043基因在布鲁氏菌感染和胞内生存中的作用奠定了基础.
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