禽流感病毒H5N1亚型HA基因表达及其产物的应用

来源 :中国病毒学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：guigui1987

【摘要】

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根据GenBank公布的禽流感病毒H5N1亚型血凝素基因（HA）（GenBank：DQ023145）序列设计一对引物P1、P2，以重组质粒pUC-HA为模板扩增去除信号肽的HA成熟蛋白。PCR产物克隆入pMD18-T载体，经

【作者】

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郑其升毕志香曹瑞兵周斌李鹏陈溥言

【机构】

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南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,山东畜牧兽医职业技术学院

【出处】

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中国病毒学

【发表日期】

：

2006年6期

【关键词】

：

H5N1亚型禽流感病毒 HA基因定点突变表达 Avian Influenza Virus （AIV） H5N1 subtype HA gene Site

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根据GenBank公布的禽流感病毒H5N1亚型血凝素基因（HA）（GenBank：DQ023145）序列设计一对引物P1、P2，以重组质粒pUC-HA为模板扩增去除信号肽的HA成熟蛋白。PCR产物克隆入pMD18-T载体，经测序发现在967位A突变为T，形成一个终止密码子TAA。在突变位点附近设计两条有21个碱基配对的突变引物P3、P4，采用重叠延伸剪切法（SOE）用A定点替换T碱基，然后将正确的基因片段定向插入到表达载体pET-32a（＋）中，诱导表达获得正确的表达产物。Western-blot分析表明

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