稳定过表达Cdx2基因胃癌细胞株的建立

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目的建立稳定过表达Cdx2基因的胃癌细胞株。方法使用阳离子脂质体分别将真核表达载体pCMV-Cdx2-HA或空载体pCMV-HA转染至人胃癌细胞MGC-803中,G418筛选出阳性克隆后扩大培养。RT-PCR和Western Blot技术检测各组胃癌细胞中Cdx2基因mRNA和蛋白的表达情况,将挑选出的稳定株命名为MGC-803/Cdx2细胞(转染组)和MGC-803/EV细胞(空载体组);流式细胞仪检测MGC-803细胞(未转染组)、MGC-803/EV细胞和MGC-803/Cdx2细胞的细胞周期和凋亡情况。结果成功筛选出稳定过表达Cdx2基因的MGC-803胃癌细胞,即MGC-803/Cdx2细胞;与MGC-803细胞和MGC-803/EV细胞比较,MGC-803/Cdx2细胞中Cdx2基因mRNA和蛋白的表达明显增加(P<0.05),而且细胞周期G0/G1期比例和凋亡率也明显增加(P<0.05)。结论成功构建了稳定过表达Cdx2基因的胃癌细胞株,而且Cdx2过表达使细胞周期停滞、凋亡增加。
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