探讨微小RNA(miRNA，miR)-10b靶向蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)调控雌激素受体阳性(ER＋)MCF-7乳腺癌细胞对他莫昔芬的耐药性。
方法建立ER＋且他莫昔芬耐药的MCF-7细胞株MCF-7-TR，实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测MCF-7细胞和MCF-7-TR细胞miR-10b表达水平。分别采用噻唑蓝(MTT)法和锥虫蓝法检测转染pre-miR-10b、miR-10b抑制物、siHDAC4的MCF-7细胞、MCF-7-TR细胞在不同他莫昔芬浓度下(0、5、10、15、20、30 μmol/L)的增殖能力和活性。采用Western blot检测HDAC4蛋白表达情况。
结果以MCF-7乳腺癌细胞miR-10b表达水平和侵袭能力作为标准，MCF-7-TR细胞乳腺癌细胞miR-10b表达水平和侵袭能力较MCF-7乳腺癌细胞分别为7.2±1.1和5.3±1.3。随着他莫昔芬浓度增加，各细胞增殖率均呈下降趋势，其中以MCF-7细胞最为明显，其次为MCF-7-TR＋miR-10b抑制物＋siHDAC4细胞以及MCF-7＋pre-miR-10b＋HDAC4细胞，而MCF-7-TR＋siHDAC4细胞和MCF-7-TR细胞增殖率下降程度最低。MCF-7细胞和MCF-7-TR＋miR-10b抑制物细胞的迁移能力下降最多，而MCF-7＋pre-miR-10b＋他莫昔芬(10 μmol/L)细胞和MCF-7-TR＋他莫昔芬(10 μmol/L)细胞的迁移能力比较差异无统计学意义(t＝1.116，P＝0.272)，但显著高于MCF-7细胞和MCF-7-TR＋miR-10b抑制物细胞(t＝0.124、10.769、14.569、11.577，P均为0.000)。MCF-7＋pre-miR-10b细胞HDAC4蛋白表达水平低于MCF-7细胞，MCF-7-TR细胞HDAC4蛋白表达水平MCF-7-TR＋miR-10b抑制物细胞，MCF-7＋siHDAC4细胞HDAC4蛋白表达水平低于MCF-7细胞。
结论miR-10b-HDAC4信号通路可能作为乳腺癌他莫昔芬耐药的一种分子机制。