HPLC法测定山野豌豆与狭山野豌豆茎叶中5个黄酮苷的含量

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目的:建立HPLC法测定山野豌豆与狭山野豌豆中金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷及山柰酚-3-O-α-L-阿拉伯糖苷的含量,为山野豌豆与狭山野豌豆的质量控制提供依据。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1;紫外检测波长350 nm;柱温25℃;进样量10μL。结果:金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷、山柰酚-3-O-α-L-阿拉伯糖苷的检测下限质量浓度分别为0.20、0.21、0.10、0.22、0.18μg·mL-1,线性范围分别为15.12756.00(r=0.999 9)、14.92746.00(r=0.999 9)、10.46523.00(r=0.999 9)、28.841442.00(r=0.999 9)、3.20160.00(r=0.999 9)μg·m L-1,精密度试验RSD分别为0.21%、0.49%、0.31%、0.12%和0.11%。山野豌豆样品中金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷、山柰酚-3-O-α-L-阿拉伯糖苷平均回收率分别为102.3%、99.2%、98.9%、98.3%和99.5%,重复性试验的RSD分别为1.4%、1.9%、1.3%、1.7%和1.2%,稳定性试验的RSD分别为0.85%、0.62%、0.91%、0.25%和0.26%;山野豌豆样品中金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷、山柰酚-3-O-α-L-阿拉伯糖苷平均含量分别为0.166、0.080、0.762、0.600和0.192 mg·g-1。狭山野豌豆样品中金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷、山柰酚-3-O-α-L-阿拉伯糖苷的平均回收率分别为101.9%、98.6%、100.1%、98.1%和99.8%,重复性试验的RSD分别为1.6%、2.1%、1.6%、2.1%和1.7%,稳定性试验的RSD分别为0.71%、0.87%、0.82%、0.15%和0.23%;狭山野豌豆样品中金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷、山柰酚-3-O-α-L-阿拉伯糖苷平均含量分别为0.735、0.919、0.526、1.312和0.173 mg·g-1。结论:该方法可用于检测狭山野豌豆与山野豌豆中金丝桃苷、异槲皮苷、山柰苷、槲皮苷、山柰酚-3-O-α-L-阿拉伯糖苷的质量浓度。
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