【摘 要】
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目的 探究不同照射强度的低能量激光（low-level laser therapy,LLLT）对衰老牙周膜干细胞（periodontal ligament stem cells,PDLSCs）增殖和成骨分化功能的影响。方法 将PDLSCs分为yPDLSCs组（年轻组,15～25岁,男3例,女3例,共10颗牙）和aPDLSCs组（老年组,40～55岁,男3例,女3例,共8颗牙）。待上述两组PDLSC
【机 构】
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西安交通大学口腔医院陕西省颅颌面精准医学研究重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（82000999）； 陕西省自然科学基础研究计划项目（2020JQ-562）；
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目的 探究不同照射强度的低能量激光（low-level laser therapy,LLLT）对衰老牙周膜干细胞（periodontal ligament stem cells,PDLSCs）增殖和成骨分化功能的影响。方法 将PDLSCs分为yPDLSCs组（年轻组,15～25岁,男3例,女3例,共10颗牙）和aPDLSCs组（老年组,40～55岁,男3例,女3例,共8颗牙）。待上述两组PDLSCs长至80%左右融合率时将细胞分为55组:yPDLSCs组（年轻组）、aPDLSCs对照组（老年对照组）、aPDLSCs 4 J/cm~2组、aPDLSCs 8 J/cm~2组和aPDLSCs 16 J/cm~2组,yPDLSCs组和aPDLSCs对照组不予以激光照射,其余3个实验组分别以4,8,16 J/cm~2 LLLT处理aPDLSCs细胞,隔天照射1次,每次照射20 s,共照射3次。克隆形成实验检测各组细胞的增殖能力。茜素红染色检测各组细胞成骨结节形成量,碱性磷酸酶（ALP）活性检测细胞ALP活性。RT-PCR法检测细胞矮小相关转录因子2（runt-related transcription factor 2,Runx2）、ALP、骨钙素（osteocalcin,OCN）表达水平。ELISA法检测细胞TNF-α分泌量。结果 与aPDLSCs对照组比较,4 J/cm~2组和8 J/cm~2组aPDLSCs的克隆形成率明显升高（P＜0.05）,16 J/cm~2组细胞的克隆形成率变化无统计学意义;与yPDLSCs组相比,aPDLSCs对照组克隆形成率明显下降（P＜0.01）。与aPDLSCs对照组比较,4 J/cm~2组和8 J/cm~2组aPDLSCs的成骨结节形成明显增多（P ＜0.05）,16 J/cm~2组aPDLSCs的成骨结节形成减少（P ＜0.05）;与yPDLSCs组相比,aPDLSCs对照组的成骨结节形成量减少（P ＜0.01）。与aPDLSCs对照组比较,8 J/cm~2组aPDLSCs中ALP活性明显升高（P＜0.01）,16 J/cm~2组aPDLSCs中ALP活性降低（P＜0.01）;与yPDLSCs组相比,aPDLSCs对照组ALP活性降低（P＜0.01）。与aPDLSCs对照组比较,8 J/cm~2组aPDLSCs的成骨相关基因Runx2、ALP、OCN表达水平明显升高（P ＜0.01）,16 J/cm~2组aPDLSCs中Runx2、ALP、OCN表达水平变化无统计学意义;与yPDLSCs组相比,aPDLSCs对照组的成骨相关基因表达水平下降（P＜0.01）。与aPDLSCs对照组比较,4 J/cm~2组和8 J/cm~2组aPDLSCs中TNF-α的分泌明显减少（P ＜0.05）,16 J/cm~2组aPDLSCs中TNF-α的分泌量变化无统计学意义;与yPDLSCs组相比,aPDLSCs对照组TNF-α的分泌量明显升高（P ＜0.01）。结论 适宜强度LLLT可提高衰老PDLSCs的增殖能力和成骨分化能力。
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