【摘 要】
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目的 探讨在激光扫描共焦显微镜(LSCM)观测活细胞的过程中,激光对细胞内反应氧(ROS)、细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)和细胞膜完整性的影响.方法 用H2DCFDA、Fluo-4AM和Calcein-A
【基金项目】
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国家自然科学基金;暨南大学校科研和教改项目;国家重点基础研究发展计划(973计划)
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目的 探讨在激光扫描共焦显微镜(LSCM)观测活细胞的过程中,激光对细胞内反应氧(ROS)、细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)和细胞膜完整性的影响.方法 用H2DCFDA、Fluo-4AM和Calcein-AM/PI分别检测488nm激光对脐静脉内皮细胞株(ECV-304)细胞内ROS、[ca2+]i和细胞膜完整性的影响,Ultra view LCI(live cell image)共聚焦成像系统采集并分析结果.结果 激光照射后细胞内 DCF 的荧光强度迅速上升,约80s达到峰值,随后下降并逐渐回到基础水平;Fluo-4的荧光强度在70min内持续平缓地上升;Calcein 的荧光强度明显下降,少量细胞PI阳性染色.结论 488nm激光照射可引起细胞内ROS和[Ca2+],的增加,但对细胞膜的完整性没有显著影响.
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