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目的
评价二十二碳六烯酸对大鼠氧糖剥夺脑微血管内皮细胞促血管生成素2(Ang-2)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。
方法将原代培养大鼠脑微血管内皮细胞采用随机数字表法分为3组(n=18):对照组(C组)、氧糖剥夺组(OGD)组和二十二碳六烯酸组(DHA组)。OGD组和DHA组采用无糖、无血清DMEM培养液培养,DHA组加入二十二碳六烯酸40 μmol,在1%O2-5%CO2-94%N2低氧培养箱中孵育;C组在常糖和常氧条件下培养。培养时间为24 h。采用AnnexinV&PI法检测细胞凋亡情况,ELISA法测定培养液上清液Ang-2、VEGF、前列腺素E2(PGE2)和前列腺素I2(PGI2)的浓度;RT-PCR法检测细胞Ang-2和VEGF的mRNA表达;Western blot法检测环氧化酶-2(COX-2)蛋白的表达。
结果与C组比较,OGD组和DHA组细胞凋亡率升高,上清液Ang-2、VEGF、PGE2和PGI2的浓度升高,细胞Ang-2、VEGF的mRNA和COX-2蛋白表达上调(P<0.05);与OGD组比较,DHA组细胞凋亡率降低,上清液Ang-2、VEGF、PGE2和PGI2浓度降低,细胞Ang-2、VEGF的mRNA和COX-2蛋白表达下调(P<0.05)。
结论二十二碳六烯酸可抑制大鼠氧糖剥夺脑微血管内皮细胞Ang-2和VEGF的表达,减少细胞凋亡,其机制与降低COX-2蛋白表达有关。