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摘要：旨在探讨人工养殖环境下叶尔羌高原鳅摄食量和主要消化酶的昼夜节律。在水温恒定（20±0.5） ℃ 条件下，观察叶尔羌高原鳅在08：00、11：00、14：00、17：00、20：00、23：00、02：00和05：00时的摄食情况，并计算其摄食量；测定昼夜演替下叶尔羌高原鳅消化器官和消化道中蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性。结果表明，叶尔羌高原鳅在20：00至次日02：00区间内摄食较多，其中摄食峰值出现在23：00；昼夜变化对叶尔羌高原鳅消化器官和消化道中消化酶活性均有影响，胃蛋白酶活性的最高值出现在23：00，脂肪酶、胰蛋白酶和淀粉酶活性的最高值出现在02：00；4种消化酶活性最低值均为14：00。叶尔羌高原鳅摄食属于日伏夜食型，夜间设置定时投喂，可促进叶尔羌高原鳅快速生长。
关键词：叶尔羌高原鳅；摄食；消化酶；昼夜节律
中图分类号： S966.4 文献标志码： A
文章编号：1002-1302（2016）11-0264-03
叶尔羌高原鳅[Triplophysa （Hedinichthys） yarkandensis （Day）]广泛分布于新疆塔里木河流域，为杂食偏动物性底栖鱼类，是塔河土著鱼类中个体较大、生长较快的品种[1]；具有蛋白质含量高、氨基酸组成全面等优点，而且其氨基酸总量也高于草鱼、鲤等常见养殖鱼类[2]，是当地人喜食的佳肴，具有一定的经济价值和养殖前景。对叶尔羌高原鳅的研究主要集中在其形态特征、生态适应、繁殖生物学、食性选择、系统分类、演化规律等方面，也有少量关于叶尔羌高原鳅食用价值、观赏价值和药用价值等方面的研究报道[3]。目前，由于生态环境变迁和人类生产活动的影响，塔里木河流域葉尔羌高原鳅数量下降明显，导致了其价格上升；叶尔羌高原鳅的人工养殖目前仍处于起步阶段，因此，对叶尔羌高原鳅营养需求及消化的研究具有一定的现实意义[4]。鱼类的消化活动受到诸多内在和外源因素的影响，其中光照强度对鱼类的摄食有明显影响；另外通过研究鱼类消化酶活力的昼夜节律，还可为养殖过程中正确掌握食物的投喂时间和投喂量提供参考。然而，叶尔羌高原鳅摄食及消化的昼夜节律未见报道[5]。本试验就叶尔羌高原鳅摄食及主要消化酶的昼夜节律进行探讨，通过测定叶尔羌高原鳅24 h中不同时间段的摄食量，以及蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的变化规律，为其人工养殖及推广等提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验动物、试剂与仪器
供试叶尔羌高原鳅捕捞自塔里木河沙雅段，捕捞时间为2014年8月，体质量（42.5±3.8）g，体长（16.3±1.7）cm。试验鱼置于长、宽、高规格为0.8 m×0.4 m×0.5 m的玻璃水族箱（具有控温、水体过滤、杀菌、充氧等装置）中，养殖水温（20±0.5） ℃，每天换水1次，所换水经曝气处理，试验水温保持在约20 ℃，pH值约7.0，溶解氧浓度大于5.0 mg/L。
胰蛋白酶、胃蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶检测试剂盒，购自南京建成生物工程研究所；其余试剂均为国产分析纯。
Carry 100型紫外-可见分光光度计，美国瓦里安；5427型台式冷冻高速离心机，德国艾本德；Elix5型超纯水仪，美国密理博；PRO250型组织匀浆仪，美国PRO；QUINTIX224-1CN型分析天平，德国赛多利斯。
1.2 试验设计
预试验5 d，期间正常投饲；正式试验为5 d（试验周期120 h），将160条试验鱼和40条后备鱼置于不同的水族箱中，日投饲量为2 g。试验期间每隔3 h投喂1 次，均为随机取样后再投喂，每次投喂量0.25 g；投喂时观察其摄食情况，采食结束后立即取样测定摄食量及消化酶活性，摄食量取叶尔羌高原鳅整个消化道内的饲料质量称体质量并计算平均值，消化酶活性测定按试剂盒说明书进行，每次取 4 尾幼鱼，采样8次/d。
1.3 粗酶液的制备及消化酶活性的测定
将活鱼使用重器敲击头部处死后立即解剖，迅速取出肝胰脏、胃、胃幽门部和全肠，使用预冷的去离子水冲洗消化道，再使用脱脂棉球擦干并精确称量，然后加9倍质量的预冷至pH值为7.5 PBS液，冰浴条件下匀浆[6]；12 000 r/min离心15 min，取其上清液即为粗酶提取液。酶活性测定需在12 h内完成，均采用检测试剂盒。其中胃蛋白酶的测定使用福林-酚法，胰蛋白酶的测定使用精氨酸乙酯法，淀粉酶的测定使用碘-淀粉比色法，脂肪酶的测定使用微乳液法。胃蛋白酶取叶尔羌高原鳅胃与胃幽门部测定，胰蛋白酶取肝胰脏和肠道部分测定，脂肪酶和淀粉酶取全部组织测定。
1.4 数据分析
数据分析使用SPSS 16.0中One-Way ANOVA进行单因素方差分析及Duncans多重比较，检验误差为5%和1%。
2 结果与分析
2.1 昼夜变化对叶尔羌高原鳅摄食的影响
叶尔羌高原鳅摄食主要集中在夜间20：00以后，其中23：00时其摄食量最高；然后随时间的延长呈下降趋势，14：00 时摄食量最低（表1）。叶尔羌高原鳅在11：00—17：00时的摄食量均极显著低于23：00时的摄食量（P<0.01），显著低于02：00、05：00、08：00、20：00时的摄食量（P<0.05）。试验结果表明叶尔羌高原鳅的摄食集中在20：0至次日 02：00 间，摄食高峰约在23：00。
2.2 叶尔羌高原鳅蛋白酶的昼夜变化
由表2可知，整个试验期内叶尔羌高原鳅胃蛋白酶（胃、幽门）和胰蛋白酶（肝胰脏、肠）的活性均为先降低后升高 （02：00—23：00）。其中胃蛋白酶的活性峰值出现在23：00，胰蛋白酶的活性峰值出现在02：00，胃蛋白酶和胰蛋白酶的活性最低值均出现在14：00。其中叶尔羌高原鳅08：00—14：00时 的胃蛋白酶活性均极显著低于23：00时的胃蛋白酶活性（P<0.01），08：00—17：00时的胰蛋白酶活性均极显著低于02：00时的胰蛋白酶活性（P<0.01）。试验中叶尔羌高原鳅蛋白酶的昼夜变化规律与摄食规律相近，表明叶尔羌高原鳅蛋白酶的昼夜变化规律与摄食活动有关。 2.3叶尔羌高原鳅脂肪酶的昼夜变化
由表3可知，整个试验期内叶尔羌高原鳅脂肪酶的活性变化较为稳定，各待测器官中脂肪酶活性峰值均出现在 02：00，活性最低值均出现在14：00，其变化趋势与胰蛋白酶相似。试验结果表明叶尔羌高原鳅08：00—17：00时的胃、幽门、肠道中脂肪酶活性均显著低于02：00、23：00、20：00时的脂肪酶活性（P<0.05），11：00—17：00时肝胰脏中脂肪酶活性均显著低于02：00、23：00时的脂肪酶活性（P<0.05），但与20：00时的脂肪酶活性差异不显著。
2.4 叶尔羌高原鳅淀粉酶的昼夜变化
由表4可知，叶尔羌高原鳅淀粉酶的活性随时间变化呈现先降低后升高的趋势，其中各组织中活性峰值均出现在02：00，活性最低值均出现在14：00。试验结果表明，除幽门外，叶尔羌高原鳅各消化组织中08：00—17：00时的淀粉酶活性均显著低于02：00时的淀粉酶活性（P<0.05），但与 05：00、20：00和 23：00 时的淀粉酶活性相比差异不显著（P>0.05）。幽门中08：00—14：00时的淀粉酶活性均显著低于02：00时的淀粉酶活性（P<0.05），但与05：00、17：00、20：00和23：00时差异不显著。试验表明昼夜变化对叶尔羌高原鳅淀粉酶活性影响较小。
3 结论与讨论
鱼类的摄食节律主要分为 4 种类型：晨昏摄食型、白天摄食型、夜间摄食型和无明显节律变化型，这是物种的遗传属性，也是其适应环境长期进化的结果。Fang等发现真鲷幼体阶段属于白天偏晨昏摄食类型，摄食强度有明显的昼夜节律[7]。李大勇等也對真鲷仔稚幼鱼的摄食节律进行了研究，结果显示真鲷仔稚幼鱼白天的摄食率高于夜间[8]。刘宇航等研究发现叉尾斗鱼仔鱼属于典型的白天摄食类型，其摄食节律与光照条件密切相关；在持续光照条件下，叉尾斗鱼仔鱼的全日各时段平均摄食量均显著增加[9]。乔志刚等研究了光照对鲇幼鱼摄食的影响，指出鲇幼鱼昼夜均有连续摄食特性，但具有明显的摄食高峰（夜间）和低谷（白天），属于典型的夜晚摄食型[10]。本试验研究结果显示，叶尔羌高原鳅摄食活动主要出现在夜间，其中20：00至次日02：00间为摄食高峰期，应属于夜食日伏型。不同种类的鱼对光照的选择适应性不同，从而对摄食结果产生影响。乔志刚等研究表明强光对仔鱼可造成较大的有害刺激，从而影响其摄食活动，并认为光照强度是影响鲇幼鱼摄食的重要因素[10]。光照对叶尔羌高原鳅摄食的影响机制还有待进一步深入的研究。
目前昼夜周期变化对水产动物消化生理影响的研究较少，Fang等均研究了昼夜变化对真鲷幼鱼消化酶活力的影响，但仅白天消化酶活力的节律变化一致[7，11]。其原因可能为白天充足的光照较黑暗有利于真鲷幼鱼的摄食，但正午的强光可能对幼鱼有较大的刺激，从而影响摄食，此原因与乔志刚等[10]报道一致，而摄食量的变化可显著影响消化酶的活性；另外幼鱼夜间摄食较少可能导致次日清晨空腹，所以摄食量明显增加，而且白天鱼的活动强度大，能量消耗多，从而促进消化酶活性提高。李大勇等对真鲷仔稚幼鱼3种酶的研究结果显示，真鲷仔稚幼鱼淀粉酶和脂肪酶最高活性均出现在白天[8]。本试验研究结果表明，昼夜变化对叶尔羌高原鳅消化道和消化器官的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性均产生影响。昼夜演替对叶尔羌高原鳅消化酶活性的影响基本上是先降后升，而且随着光照强度的增加，消化酶的活性均不断下降，其中在光照强度最高的14：00时活性均为最低；其后，随着夜间来临，光照减弱，消化酶活性又随之增强。试验中叶尔羌高原鳅消化器官中蛋白酶的活力高于其他消化酶，这一结果与王帅等对叶尔羌高原鳅在饥饿胁迫条件下的结果[5]一致，表明叶尔羌高原鳅主要依赖蛋白质提供能量。另外，鱼类肝胰脏主要分泌蛋白酶原，因此肝胰脏的蛋白酶活性较低，而肠道中可分泌激活蛋白酶原的物质，有助于肠道对蛋白质的消化吸收；试验显示叶尔羌高原鳅胃蛋白酶活性较低，表明肠道可能是叶尔羌高原鳅蛋白酶消化的主要部位。相比于蛋白酶，叶尔羌高原鳅的脂肪酶活力较弱，另外随着光照强度的增加，叶尔羌高原鳅的脂肪酶和淀粉酶下降均不明显，表明在昼夜变化下，由于受到食物蠕动等刺激，脂肪酶和淀粉酶均能保持一定的活性。研究表明食物蠕动的机械刺激可有效促进消化酶的分泌量，而且食物可通过视觉、嗅觉等影响神经系统对消化系统的调控，白天光线充足，叶尔羌高原鳅的感觉器官受到饵料的刺激，有可能保持部分消化酶活性[12-14]。但白天消化酶活性较低，不能判断是否具有消化食物的能力。另外，叶尔羌高原鳅的胃容量较小，夜间时段摄食的食物可能无法满足长时间的消耗，导致鱼体白天处于饥饿状态，因此，白天适当遮挡光照，并在合适时间投喂食物，对叶尔羌高原鳅幼鱼的生长发育是有利的，从而也能提高人工育苗的成活率。
在昼夜演替条件下，叶尔羌高原鳅的摄食集中在 20：00—02：00 间，蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活力均呈现先降后升的趋势，其活性峰值出现在23：00—02：00之间，最低值均出现在14：00。表明叶尔羌高原鳅的最适投喂时间为夜间，其摄食节律应为夜食日伏型。
参考文献：
[1]陈生熬，姚 娜，任道全，等. 塔里木河上游叶尔羌高原鳅种群结构研究[J]. 东北农业大学学报，2014，45（8）：90-97.
[2]王 帅，陈生熬，宋 勇，等. 塔里木河叶尔羌高原鳅营养成分分析[J]. 水生态学杂志，2011，32（1）：137-141.
[3]陈生熬，马春晖，丁慧萍，等. 塔里木河叶尔羌高原鳅繁殖生物学研究[J]. 水生生物学报，2013，37（5）：810-816.
[4]陈生熬，姚 娜，王智超，等. 塔里木河叶尔羌高原鳅摄食和生长的研究[J]. 上海海洋大学学报，2014，23（3）：374-381.
[5]王 帅，姚 娜，范镇明，等. 饥饿对叶尔羌高原鳅消化道指数及消化酶活性的影响[J]. 西北农业学报，2014，23（9）：14-18. [6]尹海富，崔中倩，宋洪建，等. 兴凯湖翘嘴鲌消化道指数及消化酶活性分布的年龄差异[J]. 东北农业大学学报，2013，44（3）：101-107.
[7]Fang L S，Chiou S F. Effect of salinity on the activities of digestive protease from the tilapia fish，Oreochromis niloticus，in different culture environments[J]. Comp Biochem Physiol，1989，93（2）：439-443.
[8]李大勇，何大仁，劉晓春.光照对真鲷仔稚幼鱼摄食的影响[J]. 台湾海峡，1994，13（1）：26-31.
[9]刘宇航，陈国柱，林小涛.不同光照条件下叉尾斗鱼仔鱼摄食节律[J]. 生态学杂志，2010，29（6）：1161-1166.
[10]乔志刚，张国梁，张英英，等. 不同光照周期下鲇幼鱼的日摄食节律[J]. 水产科学，2008，27（10）：511-515.
[11]王重刚，陈品健，郑森林. 真鲷幼鱼消化酶活性的昼夜变化[J]. 水产学报，1999，23（2）：199-201.
[12]于 娜，李加儿，区又君，等. 盐度胁迫及昼夜变化对鲻鱼幼鱼消化酶活力的影响[J]. 南方水产科学，2011，7（6）：52-57.
[13]Squires E J，Haard N F，Feltham L A. Gastric proteases of the greenland cod gadus ogac. Ⅱ. Structural properties[J]. Biochemistry and Cell Biology，1986，64（3）：215-222.
[14]Sánchez-Chiang L，Cisternas E，Ponce O. Partial purification of pepsins from adult and juvenile salmon fish Oncorhynchus keta. Effect of NaCl on proteolytic activities[J]. Comparative Biochemistry and Physiology Part B：Comparative Biochemistry，1987，87（4）：793-797.
关键词：叶尔羌高原鳅；摄食；消化酶；昼夜节律
中图分类号： S966.4 文献标志码： A
文章编号：1002-1302（2016）11-0264-03
叶尔羌高原鳅[Triplophysa （Hedinichthys） yarkandensis （Day）]广泛分布于新疆塔里木河流域，为杂食偏动物性底栖鱼类，是塔河土著鱼类中个体较大、生长较快的品种[1]；具有蛋白质含量高、氨基酸组成全面等优点，而且其氨基酸总量也高于草鱼、鲤等常见养殖鱼类[2]，是当地人喜食的佳肴，具有一定的经济价值和养殖前景。对叶尔羌高原鳅的研究主要集中在其形态特征、生态适应、繁殖生物学、食性选择、系统分类、演化规律等方面，也有少量关于叶尔羌高原鳅食用价值、观赏价值和药用价值等方面的研究报道[3]。目前，由于生态环境变迁和人类生产活动的影响，塔里木河流域葉尔羌高原鳅数量下降明显，导致了其价格上升；叶尔羌高原鳅的人工养殖目前仍处于起步阶段，因此，对叶尔羌高原鳅营养需求及消化的研究具有一定的现实意义[4]。鱼类的消化活动受到诸多内在和外源因素的影响，其中光照强度对鱼类的摄食有明显影响；另外通过研究鱼类消化酶活力的昼夜节律，还可为养殖过程中正确掌握食物的投喂时间和投喂量提供参考。然而，叶尔羌高原鳅摄食及消化的昼夜节律未见报道[5]。本试验就叶尔羌高原鳅摄食及主要消化酶的昼夜节律进行探讨，通过测定叶尔羌高原鳅24 h中不同时间段的摄食量，以及蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的变化规律，为其人工养殖及推广等提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 试验动物、试剂与仪器
供试叶尔羌高原鳅捕捞自塔里木河沙雅段，捕捞时间为2014年8月，体质量（42.5±3.8）g，体长（16.3±1.7）cm。试验鱼置于长、宽、高规格为0.8 m×0.4 m×0.5 m的玻璃水族箱（具有控温、水体过滤、杀菌、充氧等装置）中，养殖水温（20±0.5） ℃，每天换水1次，所换水经曝气处理，试验水温保持在约20 ℃，pH值约7.0，溶解氧浓度大于5.0 mg/L。
胰蛋白酶、胃蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶检测试剂盒，购自南京建成生物工程研究所；其余试剂均为国产分析纯。
Carry 100型紫外-可见分光光度计，美国瓦里安；5427型台式冷冻高速离心机，德国艾本德；Elix5型超纯水仪，美国密理博；PRO250型组织匀浆仪，美国PRO；QUINTIX224-1CN型分析天平，德国赛多利斯。
1.2 试验设计
预试验5 d，期间正常投饲；正式试验为5 d（试验周期120 h），将160条试验鱼和40条后备鱼置于不同的水族箱中，日投饲量为2 g。试验期间每隔3 h投喂1 次，均为随机取样后再投喂，每次投喂量0.25 g；投喂时观察其摄食情况，采食结束后立即取样测定摄食量及消化酶活性，摄食量取叶尔羌高原鳅整个消化道内的饲料质量称体质量并计算平均值，消化酶活性测定按试剂盒说明书进行，每次取 4 尾幼鱼，采样8次/d。
1.3 粗酶液的制备及消化酶活性的测定
将活鱼使用重器敲击头部处死后立即解剖，迅速取出肝胰脏、胃、胃幽门部和全肠，使用预冷的去离子水冲洗消化道，再使用脱脂棉球擦干并精确称量，然后加9倍质量的预冷至pH值为7.5 PBS液，冰浴条件下匀浆[6]；12 000 r/min离心15 min，取其上清液即为粗酶提取液。酶活性测定需在12 h内完成，均采用检测试剂盒。其中胃蛋白酶的测定使用福林-酚法，胰蛋白酶的测定使用精氨酸乙酯法，淀粉酶的测定使用碘-淀粉比色法，脂肪酶的测定使用微乳液法。胃蛋白酶取叶尔羌高原鳅胃与胃幽门部测定，胰蛋白酶取肝胰脏和肠道部分测定，脂肪酶和淀粉酶取全部组织测定。
1.4 数据分析
数据分析使用SPSS 16.0中One-Way ANOVA进行单因素方差分析及Duncans多重比较，检验误差为5%和1%。
2 结果与分析
2.1 昼夜变化对叶尔羌高原鳅摄食的影响
叶尔羌高原鳅摄食主要集中在夜间20：00以后，其中23：00时其摄食量最高；然后随时间的延长呈下降趋势，14：00 时摄食量最低（表1）。叶尔羌高原鳅在11：00—17：00时的摄食量均极显著低于23：00时的摄食量（P<0.01），显著低于02：00、05：00、08：00、20：00时的摄食量（P<0.05）。试验结果表明叶尔羌高原鳅的摄食集中在20：0至次日 02：00 间，摄食高峰约在23：00。
2.2 叶尔羌高原鳅蛋白酶的昼夜变化
由表2可知，整个试验期内叶尔羌高原鳅胃蛋白酶（胃、幽门）和胰蛋白酶（肝胰脏、肠）的活性均为先降低后升高 （02：00—23：00）。其中胃蛋白酶的活性峰值出现在23：00，胰蛋白酶的活性峰值出现在02：00，胃蛋白酶和胰蛋白酶的活性最低值均出现在14：00。其中叶尔羌高原鳅08：00—14：00时 的胃蛋白酶活性均极显著低于23：00时的胃蛋白酶活性（P<0.01），08：00—17：00时的胰蛋白酶活性均极显著低于02：00时的胰蛋白酶活性（P<0.01）。试验中叶尔羌高原鳅蛋白酶的昼夜变化规律与摄食规律相近，表明叶尔羌高原鳅蛋白酶的昼夜变化规律与摄食活动有关。 2.3叶尔羌高原鳅脂肪酶的昼夜变化
由表3可知，整个试验期内叶尔羌高原鳅脂肪酶的活性变化较为稳定，各待测器官中脂肪酶活性峰值均出现在 02：00，活性最低值均出现在14：00，其变化趋势与胰蛋白酶相似。试验结果表明叶尔羌高原鳅08：00—17：00时的胃、幽门、肠道中脂肪酶活性均显著低于02：00、23：00、20：00时的脂肪酶活性（P<0.05），11：00—17：00时肝胰脏中脂肪酶活性均显著低于02：00、23：00时的脂肪酶活性（P<0.05），但与20：00时的脂肪酶活性差异不显著。
2.4 叶尔羌高原鳅淀粉酶的昼夜变化
由表4可知，叶尔羌高原鳅淀粉酶的活性随时间变化呈现先降低后升高的趋势，其中各组织中活性峰值均出现在02：00，活性最低值均出现在14：00。试验结果表明，除幽门外，叶尔羌高原鳅各消化组织中08：00—17：00时的淀粉酶活性均显著低于02：00时的淀粉酶活性（P<0.05），但与 05：00、20：00和 23：00 时的淀粉酶活性相比差异不显著（P>0.05）。幽门中08：00—14：00时的淀粉酶活性均显著低于02：00时的淀粉酶活性（P<0.05），但与05：00、17：00、20：00和23：00时差异不显著。试验表明昼夜变化对叶尔羌高原鳅淀粉酶活性影响较小。
3 结论与讨论
鱼类的摄食节律主要分为 4 种类型：晨昏摄食型、白天摄食型、夜间摄食型和无明显节律变化型，这是物种的遗传属性，也是其适应环境长期进化的结果。Fang等发现真鲷幼体阶段属于白天偏晨昏摄食类型，摄食强度有明显的昼夜节律[7]。李大勇等也對真鲷仔稚幼鱼的摄食节律进行了研究，结果显示真鲷仔稚幼鱼白天的摄食率高于夜间[8]。刘宇航等研究发现叉尾斗鱼仔鱼属于典型的白天摄食类型，其摄食节律与光照条件密切相关；在持续光照条件下，叉尾斗鱼仔鱼的全日各时段平均摄食量均显著增加[9]。乔志刚等研究了光照对鲇幼鱼摄食的影响，指出鲇幼鱼昼夜均有连续摄食特性，但具有明显的摄食高峰（夜间）和低谷（白天），属于典型的夜晚摄食型[10]。本试验研究结果显示，叶尔羌高原鳅摄食活动主要出现在夜间，其中20：00至次日02：00间为摄食高峰期，应属于夜食日伏型。不同种类的鱼对光照的选择适应性不同，从而对摄食结果产生影响。乔志刚等研究表明强光对仔鱼可造成较大的有害刺激，从而影响其摄食活动，并认为光照强度是影响鲇幼鱼摄食的重要因素[10]。光照对叶尔羌高原鳅摄食的影响机制还有待进一步深入的研究。
目前昼夜周期变化对水产动物消化生理影响的研究较少，Fang等均研究了昼夜变化对真鲷幼鱼消化酶活力的影响，但仅白天消化酶活力的节律变化一致[7，11]。其原因可能为白天充足的光照较黑暗有利于真鲷幼鱼的摄食，但正午的强光可能对幼鱼有较大的刺激，从而影响摄食，此原因与乔志刚等[10]报道一致，而摄食量的变化可显著影响消化酶的活性；另外幼鱼夜间摄食较少可能导致次日清晨空腹，所以摄食量明显增加，而且白天鱼的活动强度大，能量消耗多，从而促进消化酶活性提高。李大勇等对真鲷仔稚幼鱼3种酶的研究结果显示，真鲷仔稚幼鱼淀粉酶和脂肪酶最高活性均出现在白天[8]。本试验研究结果表明，昼夜变化对叶尔羌高原鳅消化道和消化器官的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性均产生影响。昼夜演替对叶尔羌高原鳅消化酶活性的影响基本上是先降后升，而且随着光照强度的增加，消化酶的活性均不断下降，其中在光照强度最高的14：00时活性均为最低；其后，随着夜间来临，光照减弱，消化酶活性又随之增强。试验中叶尔羌高原鳅消化器官中蛋白酶的活力高于其他消化酶，这一结果与王帅等对叶尔羌高原鳅在饥饿胁迫条件下的结果[5]一致，表明叶尔羌高原鳅主要依赖蛋白质提供能量。另外，鱼类肝胰脏主要分泌蛋白酶原，因此肝胰脏的蛋白酶活性较低，而肠道中可分泌激活蛋白酶原的物质，有助于肠道对蛋白质的消化吸收；试验显示叶尔羌高原鳅胃蛋白酶活性较低，表明肠道可能是叶尔羌高原鳅蛋白酶消化的主要部位。相比于蛋白酶，叶尔羌高原鳅的脂肪酶活力较弱，另外随着光照强度的增加，叶尔羌高原鳅的脂肪酶和淀粉酶下降均不明显，表明在昼夜变化下，由于受到食物蠕动等刺激，脂肪酶和淀粉酶均能保持一定的活性。研究表明食物蠕动的机械刺激可有效促进消化酶的分泌量，而且食物可通过视觉、嗅觉等影响神经系统对消化系统的调控，白天光线充足，叶尔羌高原鳅的感觉器官受到饵料的刺激，有可能保持部分消化酶活性[12-14]。但白天消化酶活性较低，不能判断是否具有消化食物的能力。另外，叶尔羌高原鳅的胃容量较小，夜间时段摄食的食物可能无法满足长时间的消耗，导致鱼体白天处于饥饿状态，因此，白天适当遮挡光照，并在合适时间投喂食物，对叶尔羌高原鳅幼鱼的生长发育是有利的，从而也能提高人工育苗的成活率。
在昼夜演替条件下，叶尔羌高原鳅的摄食集中在 20：00—02：00 间，蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活力均呈现先降后升的趋势，其活性峰值出现在23：00—02：00之间，最低值均出现在14：00。表明叶尔羌高原鳅的最适投喂时间为夜间，其摄食节律应为夜食日伏型。
参考文献：
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