S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的原核可溶性表达及其转化应用

来源 :中国医药工业杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:thomson888
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为提高来源于拟南芥的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(SAM1)在大肠埃希菌中的可溶性表达水平,采用无缝克隆的方法分别将谷胱甘肽巯基转移酶、TrxA蛋白、小分子泛素样修饰物(SUMO)蛋白、MsyB蛋白、泛素类蛋白这5种不同的融合标签与SAM1进行了N端融合表达.结果 表明,SUMO蛋白作为融合标签时,SAM1表达菌株的可溶性蛋白表达量显著高于无融合标签的SAM1表达菌株,其细胞内可溶性蛋白总量达到401.19 mg/L.此外,对融合了SUMO蛋白标签的SAM1菌株和原始菌株进行菌体转化研究.结果 表明,在菌体量相同的条件下,SUMO蛋白作为融合标签的SAM1表达菌株对底物的转化率为69.80%,相比原始菌株提高了40.51%.因此,选择SUMO蛋白作为融合标签能显著提高SAM1在大肠埃希菌中的可溶表达水平,为下一步对S-腺苷甲硫氨酸合成酶进行工业化应用提供参考.
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