目的 研究B、C基因型乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白氨基酸差异对反式激活能力的影响.方法以DNAMAN软件对GenBank中B、C基因型HBV的X蛋白进行氨基酸同源比较,确定B、C基因型HBV X蛋白各自的保守氨基酸序列并分析基因型特异性氨基酸.以相应核苷酸序列为参照,通过基因定点突变的方式获得保守的B、C型HBVX基因(分别为XB及XC)并构建真核表达载体pcDNA3.1-XB及pcDNA3.1-XC.将表达载体与报告质粒pCMVβ(含CMV即刻早期启动子)共同转染HepG2细胞并检测细胞内β-半乳糖苷酶的活性,实验数据以配对t检验进行分析.结果B、C型HBV X蛋白之间共有17个氨基酸差异,主要位于蛋白的反式抑制区及反式激活功能区.β-半乳糖苷酶在各组转染细胞内的活性依次为pcDNA3.1-XB+pCMVβ组＞pcDNA3.1-XC+pCMVβ组＞pcDNA3.1/Hygro(-)+pCMVβ组(对照组).结论B、C基因型HBV X蛋白对CMV即刻早期启动子均有反式激活能力,且B基因型HBV X蛋白要强于C基因型,这种差别与B、C基因型间X蛋白的17个氨基酸差异有关.X蛋白反式激活能力的不同与B、C基因型HBV产生不同的临床及病理表现的关系有待进一步研究。